嵌合分子易化降解前列腺癌细胞雄激素受体及抑制细胞增殖的机制研究

摘要

本文对嵌合分子易化降解前列腺癌细胞雄激素受体及抑制细胞增殖的机制进行了研究。使用嵌合分子易化降解前列腺癌细胞雄激素受体蛋白观察雄激素受体蛋白降解前后细胞增殖的变化，以探索雄激素受体在前列腺癌激素依赖向激素非依赖转变中的作用。蛋白免疫印迹和细胞免疫组织化学检测证实嵌合分子通过泛素—蛋白酶体系统易化降解雄激素受体。雄激素受体消融后，细胞生长抑制，MTT细胞活力测定显示活力减退，细胞免疫组织化学和酶联免疫吸附测定前列腺特异抗原合成分泌减少，蛋白免疫印迹和流式细胞术均检测到细胞早期凋亡指标。在无雄激素、生理浓度雄激素或雄激素受体消融条件下分别观察激素依赖或非依赖前列腺癌细胞雄激素受体转录因子途径和磷酸化激酶途径的变化，发现雄激素依赖前列腺癌细胞在生理浓度雄激素环境中转录因子途径和磷酸化激酶途径均不同程度激活，雄激素非依赖前列腺癌细胞在无雄激素环境中磷酸化激酶途径始终保持激活，给予生理浓度雄激素刺激后转录因子途径激活而磷酸化激酶途径受到抑制。两种细胞雄激素受体消融后两条途径均受到抑制。本课题首次将嵌合分子技术应用于疾病研究领域，验证雄激素受体在激素依赖或非依赖前列腺癌细胞均发挥维持增殖的作用。本课题提出雄激素受体转录因子途径和非转录因子途径的相互竞争假说，认为转录因子途径依赖于雄激素，占有主导优势，效应慢，磷酸化激酶途径激活快速，效应快但易被转录因子途径竞争抑制。该假说不但能解释前列腺癌雄激素依赖向非依赖转变，而且为针对消融雄激素受体的前列腺癌内分泌治疗提供了实验依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一部分DHT-PROTAC易化降解前列腺癌细胞雄激素受体蛋白

一、引言

二、材料与方法

三、结果

四、讨论

五、小结

第二部分DHT-PROTAC易化降解雄激素受体蛋白抑制前列腺细胞增殖

一、引言

二、材料与方法

三、结果

四、讨论

五、小结

第三部分DHT-PROTAC易化降解前列腺癌细胞雄激素受体后信号转导途径的变化

一、引言

二、材料与方法

三、结果

四、讨论

五、小结

参考文献

致谢

附录 已发表论著