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目录
符号说明
第一章 文献综述
1. 鸡传染性支气管炎概述
1.1 发现简史
1.2 病原学
1.3 流行病学
1.4 诊断
1.5 防治
2. 基因工程单链抗体概述
2.1 单链抗体的结构
2.2 单链抗体基因的扩增
2.3 单链抗体的表达
2.4 基因工程单链抗体在动物疾病研究中的应用
2.5 scFv的前景展望
3. 研究目的和意义
第二章抗IBV单链抗体原核表达质粒的构建
1. 材料
1.1 实验动物、毒株与菌种
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
1.4 主要溶液的配制
2. 实验方法
2.1 鸡的免疫及阴性、阳性血清制备
2.2 脾脏总RNA提取
2.3 引物设计
2.4 目的基因的扩增
2.5 scFv原核表达质粒的构建与鉴定
2.6 可溶性scFv的诱导表达
2.7 周质腔中scFv提取
2.8 测序
2.9 SDS-PAGE鉴定重组蛋白的表达
2.10 可溶性scFv的纯化
2.11 紫外分光光度法测周质腔中scFv浓度
3. 结果
3.1 目的基因扩增结果
3.2 质粒提取
3.3 重组质粒的双酶切鉴定
3.4 重组质粒转化感受态细胞JM109(DE3)
3.5 菌落PCR鉴定
3.6 测序结果及Blast序列分析
3.7 重组质粒的诱导表达结果
3.8 紫外分光光度法测样品中scFv浓度
4. 讨论
第三章间接ELISA筛选方法的建立及试验条件优化
第一节 抗原的制备及纯化鉴定
1. 材料
2. 实验方法
3.结果
4.讨论
第二节间接ELISA筛选方法的建立
1.材料
2. 实验方法
3. 结果
4.讨论
第四章全文总结
参考文献
攻读硕士期间发表的论文
致谢
上海交通大学;