Snail、Slug、Twist基因在口腔鳞癌中的表达及意义

摘要

目的：上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)是多细胞生物胚胎发生中的基本过程，也在肿瘤发生发展过程中起重要作用。Snail、Slug和Twist基因是EMT过程中重要的调控因子，均可抑制E-cadherin，促进肿瘤细胞的侵袭与转移。我们先前的研究发现，E-cadherin在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)中表达下调，其表达水平与患者预后有关。在人类多种实体瘤包括鼻咽癌、食管癌中，Twist、Snail和Slug表达都显著增高，且与肿瘤的组织学分级、临床病理分期、淋巴结转移及预后密切有关。本研究旨在明确Snail、Slug和Twist在OSCC中的表达情况以及其表达水平与OSCC临床病理因素之间的关系。
　　 方法：1.应用荧光定量RT-PCR(real-time polymerase chain reaction，Real-timeRT-PCR)和免疫组织化学(immunohistochemistry，IHC)法在34例OSCC组织标本中初步验证Snail、Slug和Twist基因的mRNA和蛋白的表达情况，探讨各基因的表达与OSCC患者年龄、性别、T分期、临床分期、病理分化程度、淋巴结转移、烟酒暴露之间的关系。
　　 2.应用IHC法检测在60例OSCC组织标本中Snail、Slug和Twist蛋白的表达，探讨其表达水平对OSCC的临床病理学意义及其与预后的关系。
　　 结果：1.Snail、Slug和Twist mRNA的在OSCC组织标本中的相对表达水平高于自身对照的癌旁组织。Twist和Slug mRNA在晚期OSCC的表达水平高于早期OSCC，并有统计学差异(p=0.018，p=0.010)。在已颈部淋巴结转移的OSCC中Twist mRNA的表达水平高于无颈部淋巴结转的OSCC，且有显著差异(p=0.001)。Snail mRNA表达水平在患者年龄、性病、T分期、临床分期、淋巴结转移、病理分级、吸烟、饮酒等因素中无显著差异性。34例OSCC组织标本中，Snail、Slug和Twist的蛋白表达率依次为64.7％、58.8％和67.3％。Twist蛋白在早期OSCC中的表达率为66.7％，晚期OSCC中的表达率为78.2％，两者有差异(p=0.016)；无淋巴结转移OSCC中表达率为58.3％，已淋巴结转移OSCC中的表达率为72.7％；两者有差异(p=0.022)。
　　 2.60例OSCC组织标本中，Snail、Slug和Twist蛋白表达率为63.3％、58.3％和70％。Twist表达水平与OSCC患者在颈部淋巴结有无转移，不同临床分期，病理分级之间有显著差异(p=0.012，p=0.004，p=0.008)。Snail、Slug蛋白表达在OSCC临床病理因素中无显著性差异。
　　 3.在6-59个月的随访期间，18例患者复发(30％，18/60)。复发患者中，2例Twist表达阴性，其余16例Twist表达阳性。OSCC复发患者的Twist蛋白表达率高。Cox回归模式分析显示，Twist蛋白表达对OSCC患者预后是一个独立的预测因素。在OSCC中，Snail、Slug蛋白表达水平与预后无关。
　　 结论：1.Twist在口腔鳞癌组织标本中高表达，Twist表达水平与患者肿瘤临床分期、病理分级、淋巴结转移及预后有关，提示其与肿瘤发生发展的关系密切，可作为预测OSCC淋巴结转移和预后的重要标志物。
　　 2.Snail和Slug在口腔鳞癌组织标本中高表达，但Snail和Slug表达水平与临床病理因素及预后无关。