大鼠脂肪组织与坐骨神经来源的许旺细胞培养及示踪的实验研究

摘要

目的：探讨从SD乳鼠皮下脂肪组织及坐骨神经中获取许旺细胞以及应用超顺磁性纳米铁颗粒（SPIO）体外标记许旺细胞的可行性。
　　 方法：显微镜下切取SD 乳鼠皮下脂肪组织，差速分离纯化获得类许旺细胞，研究其生物学特性及组织内定位，并应用于硅胶管内，修复10mm 长坐骨神经缺损。切取乳鼠坐骨神经，应用Dispase II 酶纯化获得许旺细胞。应用SPIO 标记后，行普鲁士蓝染色、透射电镜及MTT 检测，研究标记后许旺细胞的生物学特性及MRI 成像示踪。
　　 结果：从SD乳鼠皮下脂肪组织中分离纯化的类许旺细胞，表达许旺细胞特异性标记，其阳性部位在小血管周围。术后4 周，神经再生已通过桥接神经的硅胶管，长至坐骨神经的远端。经过Dispase II 酶的差速纯化，可以从SD 乳鼠坐骨神经中获得大量高纯度的许旺细胞。将SPIO 与许旺细胞共同培养24 小时后，普鲁士蓝染色见细胞内蓝染的铁颗粒，透射电镜证实铁颗粒位于细胞的吞噬泡或溶酶体中，体外MRI 呈明显的低信号改变。
　　 结论：从SD 乳鼠皮下脂肪组织中可以分离纯化获得类许旺细胞，其来源可能为脂肪组织内的细小神经纤维束，并能够应用于人工神经的构筑，促进神经的再生。Dispase II 酶是一种纯化许旺细胞的关键酶，短期内可从坐骨神经中获得大量高纯度的许旺细胞。SPIO 能够用于标记许旺细胞，MRI 可以对其进行示踪和监测。

目录

绪论

第一章从乳鼠皮下脂肪组织中分离纯化许旺细胞的实验研究

第二章乳鼠坐骨神经许旺细胞的分离、培养与鉴定

第三章超顺磁性纳米铁颗粒（SPIO）标记许旺细胞的体外实验研究

全文总结

参考文献

附录（综述）SPIO SPIO SPIO SPIO 标记干细胞及标记干细胞及标记干细胞及标记干细胞及MRI MRI MRI MRI 活体示踪的研究进展活体示踪的研究进展活体示踪的研究进展活体示踪的研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文及申请专利

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