脂肪组织局部缺氧对MCP-1表达的影响及其机制研究

摘要

目的：本课题旨在体外和整体水平探讨脂肪组织局部缺氧对MCP-1表达的影响及其可能的分子机制。
　　 方法：本课题分为细胞实验和动物实验两部分。第一部分为细胞实验，利用氯化钴（CoCl2）诱导小鼠3T3-L1 成熟脂肪细胞低氧模型以及诱导前脂肪细胞低氧分化，实时定量聚合酶链反应法（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测低氧诱导因子（HIF-1α）的表达水平；Real-time PCR、酶联免疫吸附法（ELISA）测定单核细胞趋化因子（MCP-1）的表达水平，并分析HIF-1α与MCP-1 在蛋白水平上的相关性。第二部分为动物实验，利用高脂高果糖饲料喂养ICR 小鼠12 周，建立伴肥胖的2 型糖尿病（T2DM）模型。每4 周测定空腹血糖（FBG）及体重； 12 周末进行腹腔注射葡萄糖耐量试验（IPGTT）并测定血浆胰岛素水平，血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）水平及血浆尿酸（uric acid）水平。Western Blot和ELISA 分别检测小鼠大网膜脂肪组织HIF-1α及MCP-1 蛋白水平。
　　 结果：（1）100μmol/L CoCl2 诱导成熟3T3-L1 脂肪细胞低氧，从而上调MCP-1 的分泌；（2）在常氧条件下，随着3T3-L1 前脂肪细胞分化成熟，HIF-1α蛋白表达水平逐渐降低而培养液中MCP-1 蛋白水平逐渐升高；在100μmol/L CoCl2 诱导的低氧条件下，HIF-1α蛋白表达水平及培养液中MCP-1 蛋白水平与分化前无显著差异；（3）高脂高果糖组小鼠体重高于对照组小鼠体重的20％，且空腹血糖平均值高于7.8mmol/L，示伴肥胖的T2DM模型造模成功；（4）模型组小鼠大网膜脂肪组织HIF-1α及MCP-1 蛋白表达水平均高于对照组小鼠。
　　 结论：（1）3T3-L1 成熟脂肪细胞在低氧条件下升高MCP-1 分泌水平，提示脂肪细胞低氧可能是脂肪组织发生低度炎症反应的重要机制之一；（2）在低氧条件下，3T3-L1 前脂肪细胞分化不良，MCP-1 蛋白分泌水平在分化前后无显著差异，提示低氧通过上调HIF-1α表达抑制脂肪细胞分化；脂肪源性MCP-1 主要由成熟脂肪细胞产生；（3）模型组小鼠大网膜脂肪组织表达的HIF-1α蛋白水平和MCP-1 蛋白水平均高于对照组小鼠，提示存在伴肥胖的T2DM 时，脂肪组织中同时存在低氧和炎症，脂肪组织局部缺氧可能是脂肪组织炎症的重要原因。

目录

前言

第一部分 MCP-1 在低氧脂肪细胞中的表达

第二部分 MCP-1 在伴肥胖的T2D 小鼠脂肪组织中的表达

全 文 结 论

参 考 文 献

致谢

综述：脂肪源性单核细胞趋化蛋白-1 在2 型糖尿病中的作用研究进展

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