五趾北京油鸡趾骨发育相关候选基因表达分析

摘要

鸡常见趾型为四趾,北京油鸡等一些国内外鸡品种表现多趾特征。已有杂交试验证明鸡多趾性状为常染色体显性遗传但外显率不同。鸡遗传图谱和比较基因组分析表明2号染色体短臂端（特别鸡遗传连锁图谱45cM处）是多趾候选基因的关键区域，而且该区域同人和鼠PPD候选基因集聚区(人类7q36区域和小鼠5号区域)高度同源。
　　为了了解鸡多趾性状的遗传基础，实验参照人类和鼠肢体发育候选基因，首次选用经过杂交测验和纯繁选育的五趾北京油鸡以及石岐杂鸡鸡胚发育时期（胚胎发育第6-10天）趾部组织作为实验材料，采用荧光定量PCR方法检测了11个可能与肢体骨骼发育有重要关联的候选基因的表达。结果显示，大部分候选基因在五趾油鸡和石岐杂鸡之间在不同时间点呈现不同程度差异表达。其中非常有趣的是，HB9基因在胚胎发育第6-10天均呈现极显著差异表达（2-ΔΔCT高达93-282）。进一步分析发现，HB9基因的物理位置恰处在鸡遗传连锁图谱2号染色体短臂端45cM处ADL270位点附近。因此，本实验推测HB9基因可能是决定北京油鸡五趾性状重要的主效基因，非常值得进一步分析研究。

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符号说明

1文献综述

1.1 脊椎动物多趾性状研究概况

1.1.1 多指（趾）性状表型

1.1.2 多指（趾）性状遗传方式

1.2 鸡多趾性状研究概况

1.2.1 鸡胚肢体发育

1.2.2 鸡多趾表型分类

1.2.3 鸡多趾表型遗传特征

1.2.4 鸡多趾性状基因定位

1.2.5 鸡多趾性状候选基因

1.3 动物性状分子遗传基础研究方法

1.3.1 基因作图法

1.3.2 侯选基因法

1.4 实时荧光定量PCR技术

1.4.1 技术原理和方法

1.4.2 技术主要应用

1.5 本研究的目的与意义

2实验部分

2.1材料方法

2.1.1 实验材料

2.1.2 实验方法

2.1.3 数据统计分析

2.2 结果与分析

2.2.1 Lmbr1基因表达

2.2.2 SHH基因表达

2.2.3 GLI3基因表达

2.2.4 EN2基因表达

2.2.5 HB9基因表达

2.2.6 Twist1基因表达

2.2.7 Hoxd13基因表达

2.2.8 dHand基因表达

2.2.9 BMP7基因表达

2.2.10 IHH基因表达

2.2.11 Alx4基因表达

2.3 讨论

2.3.1 候选基因的选择

2.3.2 候选基因的表达

2.3.3 Hlxb9/HB9基因

3结论

附录一

附录二

参考文献

致谢

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