Hippo信号通路作用分子TAZ在人骨肉瘤及骨肉瘤干细胞中的表达

摘要

目的：检测在人骨肉瘤组织、骨肉瘤MG63细胞及骨肉瘤干细胞中Hippo信号通路作用分子TAZ的表达情况，比较骨肉瘤细胞和骨肉瘤干细胞中TAZ的表达差异，并探讨TAZ在人骨肉瘤中可能的临床意义。
　　方法：从2010年1月至2012年1月，在我院骨肿瘤科治疗的骨肉瘤患者中，选取原发四肢骨肉瘤组织标本12例，复发的四肢骨肉瘤标本6例，另外，选取6例骨纤维结构不良组织作为阴性对照，并贴壁培养骨肉瘤MG63细胞，采用免疫组化方法检测骨肉瘤组织和骨肉瘤MG63细胞中TAZ的表达情况；用无血清培养基悬浮培养骨肉瘤 MG63细胞，观察骨肉瘤 MG63细胞成球情况并计算成球比，然后，分离并收集骨肉瘤细胞球，通过实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测骨肉瘤 MG63细胞及骨肉瘤细胞球中胚胎干细胞标志基因Nanog、Oct4和Hippo信号作用分子TAZ的表达，通过Western印记法检测MG63细胞和细胞球中TAZ蛋白的表达情况，并比较其表达差异。
　　结果：在12例人骨肉瘤原发组织标本中，3例骨肉瘤组织TAZ表达阳性，而6例人骨肉瘤复发组织中TAZ表达全部阳性，在骨肉瘤细胞MG63中TAZ蛋白表达也呈阳性，而在骨纤维结果不良中TAZ全部表达阴性。与骨肉瘤MG63细胞相比，RT-PCR显示培养的骨肉瘤细胞球中干细胞标志基因Nanog，Oct4和Hippo信号分子TAZ明显高表达。Western blot提示细胞球中TAZ蛋白表达明显高于骨肉瘤MG63细胞。两组之间TAZ的表达差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　结论：骨肉瘤组织中存在 TAZ蛋白的表达，而在复发的骨肉瘤组织中呈高表达；在骨肉瘤细胞株中也存在 TAZ分子的表达，而在骨肉瘤干细胞中 TAZ分子表达更高；提示其与骨肉瘤组织复发及骨肉瘤干细胞的相关特征可能有一定的相关性。

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第一章 绪论

1.1 引言

1.2 骨肉瘤的治疗现状

1.3 肿瘤干细胞理论

1.4 骨肉瘤干细胞的研究

1.5 Hippo信号通路及其作用分子TAZ

参考文献：

第二章 Hippo信号通路作用分子TAZ在人骨肉瘤及骨肉瘤干细胞中的表达

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 结论

参考文献：

致谢

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附录 综述:肿瘤中Hippo-TAZ信号通路研究进展