葛根素对极低频电磁场引起的巩膜病理改变的作用

摘要

目的：
　　研究葛根素对极低频电磁场（ELF-EMFs）引起的豚鼠巩膜及体外培养的人胚胎眼巩膜成纤维细胞（HFSFs）病理改变的作用。
　　方法：
　　利用自制的稳定可调的模拟生活辐照磁场的 ELF-EMFs系统分别对出生1周的豚鼠和体外培养的HFSFs进行辐照，同时给予葛根素干预。
　　记录豚鼠在实验0、2、4、8周时屈光度和眼轴长度，实验结束时处死豚鼠，对其眼后极部巩膜进行 HE染色光学显微镜检查和透射电子显微镜检查。
　　MTT法检测HFSFs经ELF-EMFs（0.2mT，50Hz）辐射0、12、24、48h后的增殖活性，以及 ELF-EMFs（0.2mT，50Hz，24h）与不同浓度葛根素（0?M、0.1?M、1?M、10?M）同时干预下HFSFs增殖活性；实时荧光定量PCR（Real-time PCR）法检测ELF-EMFs（0.2mT，50Hz，24h）作用下不同浓度葛根素组HSFs内COL1A1和 MMP-9 mRNA转录水平；蛋白印迹法（Western Blot）检测ELF-EMFs（0.2mT，50Hz，24h）作用下不同浓度葛根素组 HFSFs内COL1A1和MMP-9蛋白表达量。
　　结果：
　　与对照组相比，辐射组豚鼠在经过ELF-EMFs辐照4周后，屈光度下降幅度和眼轴增长幅度变化明显(P<0.05)，辐照时间越长变化越明显，而葛根素干预后豚鼠屈光度下降幅度和眼轴增长幅度减小。HE染色光镜检查与电镜检查结果显示 ELF-EMFs作用下豚鼠巩膜胶原纤维排列紊乱、变形，小直径纤维数量增多，而葛根素干预下变化明显减轻。
　　体外培养的HFSFs经ELF-EMFs(0.2mT、50Hz)作用24小时后，增殖活性开始降低，COL1A1表达下调，而MMP-9表达上调；1?M起葛根素可使ELF-EMFs(0.2mT、50Hz、24h)作用下HFSFs增殖活性增强，0.1?M起葛根素可使HFSFs内COL1A1蛋白表达和mRNA转录上调，而MMP-9蛋白表达和mRNA转录下调。
　　结论：
　　ELF-EMFs可使豚鼠屈光度下降幅度和眼轴增长幅度增大，豚鼠巩膜微结构发生形态学改变，使体外培养的HFSFs增殖活性下降、COL1A1表达上调、MMP-9表达下调，是巩膜发生病理性重塑改变的一个可能诱发因素，而葛根素可对抗保护 ELF-EMFs引起的豚鼠巩膜和HFSFs的病理改变，是ELF-EMFs诱发的巩膜病理改变的一个保护性因素。

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缩略语简表

前言

一、 极低频电磁场对人体健康危害的研究现状

二、 极低频电磁场对眼球影响及我们前期研究基础

三、巩膜基质重塑机理

四、 葛根素的应用及机制研究现状

五、实验条件的选择

六 本实验的研究目的和途径

第一章 葛根素对ELF-EMFs引起的豚鼠巩膜病变的作用

1.1材料

1.2方法

1.3结果

1.4讨论

第二章 葛根素对ELF-EMFs引起的HFSFs增殖及COL1A1和MMP-9表达的作用

2.1材料

2.2 方法

2.3结果

2.4 讨论

第三章 总结与展望

3.1全文总结

3.2不足与展望

参考文献

综述: 葛根素在眼科的应用进展

致谢

攻读学位期间撰写和发表的学术论文