RGD偶联RNase A-CdTe量子点纳米探针的制备及其在黑色素瘤诊断应用的初步研究

摘要

目的：制备精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）与核糖核酸酶（RNase A）修饰的碲化镉（CdTe）量子点（quantum dot，QDs）的纳米探针，观察其对恶性黑色素瘤细胞A375的靶向效果。
　　方法：利用微波加热方法得到核糖核酸酶修饰的碲化镉量子点（CdTe RQDs），再化学键合偶联RGD多肽得到RGD-CdTe RQDs纳米探针并通过透射电镜，粉末晶体衍射、荧光光谱仪和紫外吸收光谱仪对其进行相应物理和光学表征，体外培养A375细胞建立细胞模型，通过SPSS软件统计分析MTT实验结果，确定用于细胞成像的RGD-CdTe RQDs探针浓度，与A375细胞共同孵育15分钟，通过激光共聚焦显微镜荧光成像的结果研究RGD-CdTe RQDs纳米探针与A375细胞之间结合的特异性。
　　结果:用微波加热方法制备分散性和生物相容性好的CdTe RQDs纳米探针，通过化学偶联成功构建RGD-CdTe RQDs纳米探针，MTT实验结果表明，不同浓度（20、40、80 nmol/L）的RGD-CdTe RQDs探针与A375细胞孵育12、24、36和72 h后，发现20 nmol/L的RGD-CdTe RQDs在12 h内对A375细胞的生命活动影响最低，选择20 nmol/L的RGD-CdTe RQDs进行的荧光成像实验，发现偶联RGD多肽的CdTe RQD纳米探针对A375细胞有明显的主动靶向效果。
　　结论:成功制备RGD-CdTe RQDs纳米探针，该荧光分子探针可以主动靶向黑色素瘤细胞。

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第一章 绪论

1.1黑色素瘤

1.1.1黑色素瘤的概念和概述

1.1.2黑色素瘤的发病机制研究

1.1.3 黑色素瘤的早期诊断

1.1.4 原发黑色素瘤的治疗

1.2 RNaseA酶

1.2.1 RNase A 的生理功能和用途

1.2.2 RNase A 的结构稳定性

1.2.3 RNase A 的抗肿瘤活性

1.3量子点

1.3.1 量子点的概念和结构

1.3.2 量子点的发光机制

1.3.3 量子点的光学性质

1.3.4量子点在细胞组织荧光成像领域的应用

1.3.5量子点在活体成像领域的应用

1.3.6 量子点在医学上的其他应用

1.4论文的选题目的和思路

参 考 文 献

第二章 RGD修饰碲化镉量子点探针对黑素瘤细胞的荧光成像学研究

2.1 引言

2.2材料与方法

主要材料和仪器试剂：

常用溶液的配制:

主要仪器

主要实验方法

2.3结果与讨论

2.3.1 RGD-CdTe 量子点的形貌表征

2.3.2 RGD-CdTe 量子点的光谱表征

2.3.3 RGD-CdTe 量子点的体外细胞毒性评价

2.3.4倒置显微镜观察细胞的形态学变化

2.3.5荧光显微镜鉴别活细胞/凋亡细胞/坏死细胞试剂盒

2.3.6 RGD-CdTe 量子点对A375细胞荧光成像

2.3.6 RGD-CdTe 量子点的细胞荧光稳定性

3.4本章小结

参 考 文 献

第三章 全文总结与展望

3.1本论文工作内容总结

3.2本论文的创新点

3.3工作展望

致谢

附录: 攻读硕士学位期间发表或投寄的论文