双价痢疾菌苗粘膜免疫保护机制及其作为基因治疗载体的初步探讨

摘要

已知机体95﹪以上的感染发生在粘膜或由粘膜入侵,尤其是呼吸道和消化道粘膜,直接面对外界环境,时时刻刻接触大量繁杂的抗原,包括病原体.因此,粘膜是病原体感染和疫苗免疫最重要也是最常见的途径.和系统免疫相比,粘膜具有其独特的性质,随着人们对粘膜特性的认识的深入,粘膜疫苗和粘膜免疫成为感染免疫学和预防医学的研究热点和前沿,研究粘膜疫苗免疫反应规律和保护机制,是粘膜疫苗研制、改进及制定免疫实施方案的重要理论基础.通过应用粘膜疫苗载体和粘膜免疫可以解决基因疫苗和基因治疗中的一些尚难以解决的问题,近年来倍受基因疫苗和基因治疗研究者的青睐.因此,粘膜疫苗的免疫保护机制及作为外源DNA的携带载体的研究具有重要的理论意义和实际意义.该文就该室构建的两类不同侵袭表型的双价痢疾菌苗,研究不同动物模型、不同粘膜途径的免疫反应和保护机制,并就其作为基因治疗载体的可能性进行了初步研究.

目录

前言

第一部分双价痢疾菌苗粘膜免疫保护机制的研究

引言

第一节侵袭蛋白对豚鼠眼粘膜免疫和保护的影响

引言

1实验材料和方法

2实验结果

3讨论

第二节双价痢疾菌苗(Ipa+/Ipa-)滴鼻免疫诱导的粘膜和系统的免疫反应

1实验材料和方法

2实验结果

3讨论

第三节两类双价痢疾菌苗不同粘膜途径免疫小鼠粘膜和血清的免疫记忆反应

1实验材料和方法

2实验结果

3、讨论

第一部分总结

第二部分双价痢疾菌苗作为DNA治疗载体的初步研究

引言

1实验材料和方法

2实验结果

2.1人血单个核细胞总RNA的提取

2.2RT-PCR法获得TRAIL分子的cDNA

2.3克隆载体的构建及鉴定

2.4DNA序列分析

2.5表达载体的构建与鉴定

2.6TRAIL分子在肺癌组织的表达

2.7表达TRAIL分子的HeLa 细胞的肿瘤杀伤活性观察

2.8TRAIL分子活细菌基因治疗系统的构建

2.9DNA治疗载体不同途径给药后小鼠外源基因-GFP融合蛋白体内表达观察

2.10双价痢疾菌苗和伤寒疫苗TRAIL DNA治疗载体不同途径给药后对小鼠淋巴细胞CD4+亚群变化

2.11双价痢疾菌苗和伤寒疫苗TRAIL DNA治疗载体滴鼻免疫对小鼠B16肿瘤的预防作用

3讨论

结论

主要参考文献

致谢

附录：（论文中主要数据表）

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