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VEGFs与其受体在小鼠牙胚发育过程中的表达研究

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前言

第一部分 VEGFs和VEGFRs基因在小鼠下颌磨牙牙胚发育过程中表达变化

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

第二部分 VEGFs和VEGFRs蛋白在小鼠颌面部器官发育过程中的组织学定位

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

全文总结

参考文献

附录1:综述:VEGFs在牙发育过程中的表达及作用机制的研究进展

致谢

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摘要

目的:
  初步明确VEGFs与VEGFRs在不同发育时期BALB/c小鼠的下颌磨牙牙胚中基因的表达变化与蛋白表达定位,探索VEGFs与VEGFRs在牙胚发育过程中可能的作用。
  材料与方法:
  (1)通过显微分离获得BALB/c小鼠 E11.5、E13.5下颌骨和E15.5、E16.5、E18.5、PN1胎鼠下颌磨牙牙胚并制备cDNA文库。通过RT-PCR法明确了VEGFs与VEGFRs基因在牙胚发生发育过程中的表达趋势。
  (2)通过荧光免疫技术检测VEGFs与VEGFRs蛋白的在E12、E14、E15、E16、E18、PN1牙胚中的定位。
  结果:
  (1)通过本研究获得E11.5、E13.5下颌骨,E15.5、E16.5、E18.5、PN1胎鼠下颌磨牙牙胚cDNA文库,为评估其他基因在BALB/c小鼠下颌骨与下颌磨牙牙胚发育过程中的表达变化的研究提供cDNA来源。VEGFs与VEGFRs的基因表达贯穿于牙胚蕾状期到牙胚钟状期牙胚发育的各个阶段。
  (2)通过荧光免疫染色技术并未检测出VEGF-A、VEGF-C、VEGFR-1蛋白的在牙胚中的定位,却在颌面部其他器官发现VEGF-B、VEGF-D、VEGFR-2、VEGFR-3等蛋白的表达定位。
  结论:
  本研究通过逆转录聚合酶链式反应和免疫荧光技术相结合的方法,初步明确了 VEGFs与VEGFRs在不同发育时期BALB/c小鼠的下颌磨牙牙胚中基因的表达变化,以及VEGF-B、VEGF-D、VEGFR-2、VEGFR-3的蛋白表达定位。本研究还不能解释VEGFs与VEGFRs蛋白在牙胚及颌面部其他器官的发育过程中的明确作用,仍需要利用蛋白与核酸的定量定性分析、器官培养等方法继续研究。

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