声明
摘要
1 绪论
1.1 SIRT家族在肿瘤中的研究进展
1.1.1 Sirt1
1.1.2 Sirt2
1.1.3 Sirt3
1.1.4 Sirt4
1.1.5 Sirt5
1.1.6 Sirt6
1.1.7 Sirt7
1.1.8 展望
1.2 本研究的目的及内容
2 SIRT2、SIRT4和SIRT5在人结肠癌组织中的表达研究
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 试剂
2.2.2 病人和结肠癌标本
2.2.3 RNA提取和实时定量反转录PCR
2.2.4 基因芯片数据库数据分析SIRT2、SIRT4和SIRT5表达水平
2.2.5 组织芯片
2.2.6 免疫组织化学
2.2.7 统计分析
2.3 结果
2.3.1 SIRT2、SIRT4和SIRT5在16对人结肠癌组织中的mRNA表达水平
2.3.2 SIRT2、SIRT4和SIRT5在TCGA表达谱芯片数据中的mRNA表达水平
2.3.3 SIRT4的蛋白表达水平在人结肠癌组织中显著降低
2.3.4 SIRT4表达与结肠癌临床病理参数的关系
2.3.5 SIRT4表达与结肠癌患者预后的关系
2.4 讨论
3 SIRT4在人胃癌组织中的表达研究
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 试剂
3.2.2 组织芯片
3.2.3 免疫组织化学
3.2.4 统计分析
3.3 结果
3.3.1 SIRT4的蛋白表达水平在人胃癌组织中显著降低
3.3.2 SIRT4表达与胃癌患者临床病理参数之间的关系
3.4 讨论
4 SIRT4对人结肠癌细胞生物学行为的影响
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 主要试剂
4.2.2 细胞系和培养条件
4.2.3 细胞培养方法
4.2.3 细胞转染
4.2.4 CCK-8检测
4.2.5 克隆形成实验
4.2.6 流式细胞仪检测细胞凋亡
4.2.7 Western blot
4.2.8 统计分析
4.3 结果
4.3.1 SIRT4抑制人结肠癌细胞生长
4.3.2 SIRT4能协同葡萄糖抑制导致的结肠癌细胞死亡
4.3.3 SIRT4能协同5-FU对结肠癌细胞的抑制
4.3.4 抑制谷氨酰胺代谢不是SIRT4抑制结肠癌细胞生长的唯一机制
4.4 讨论
5 结论
5.1 本研究的创新性成果
5.1.1 SIRT4在人结肠癌中是一个抑癌基因
5.1.2 SIRT4能增加结肠癌细胞对葡萄糖代谢抑制剂和5-FU的敏感性
5.1.3 SIRT4对肿瘤细胞的抑制不仅仅是通过抑制谷氨酰胺代谢引起的
5.1.4 SIRT4在人胃癌中表达降低并与胃癌恶性程度相关
5.2 本研究的不足之处
5.2.1 没有分析SIRT4与人胃癌患者预后的关系
5.2.2 没有进行过表达SIRT4对人结肠癌细胞体内成瘤的影响
5.2.3 没有进行敲减SIRT4对人结肠癌细胞功能的影响研究
参考文献
致谢
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