癌胚抗原相关黏附分子1在乳腺癌中的表达及其作用研究

摘要

目的：1、研究CEACAM1在乳腺癌中的表达情况。2、探讨CEACAM1在乳腺癌侵袭转移中的作用及机制。3、探讨CEACAM1在乳腺癌血管新生中的作用及机制。
　　方法:1、应用免疫组化方法检测乳腺癌组织、癌旁正常组织和乳腺良性疾病组织CEACAM1表达水平，并分析其与术后病理资料的相关性；2、通过ELISA法检测乳腺癌细胞培养上清中可溶性CEACAM1水平；3、免疫荧光技术检测乳腺癌细胞膜结合型CEACAM1表达水平；4、运用RT-PCR及western blot检测CEACAM1在乳腺癌细胞表达情况，并与正常乳腺上皮细胞比较分析；5、构建CEACAM1过表达载体，通过瞬时转染法在内源性CEACAM1低表达的细胞中过表达CEACAM1；6、进行体外侵袭和迁移实验，检测CEACAM1对乳腺癌细胞侵袭力和迁移力的影响；7、CCK-8细胞增殖实验检测CEACAM1对乳腺癌细胞增殖的影响；8、利用免疫荧光技术及western blot检测CEACAM1对乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)相关标志物及细胞内信号通路的影响；9、免疫组化法检测乳腺癌血管新生情况，通过计算微血管密度(MVD)分析其与CEACAM1表达的相关性；10、通过体外血管生成实验，观察CEACAM1对乳腺癌细胞促血管新生能力的影响；11、ELISA法检测CEACAM1对乳腺癌细胞分泌VEGFs的影响。
　　结果：1、免疫组化结果表明，乳腺癌组织CEACAM1染色强度明显低于癌旁正常组织和乳腺良性疾病组织；2、乳腺癌细胞(BT549，Hs578T，MDA-MB-468，MDA-MB-231，T47D，MCF7)培养上清可溶性CEACAM1水平均低于正常乳腺上皮细胞(MCF10A)；3、免疫荧光检测结果表明，乳腺癌细胞膜结合型CEACAM1表达强度明显低于正常对照细胞；4、mRNA和蛋白水平检测结果提示，乳腺癌细胞CEACMA1的表达水平同样明显低于正常对照细胞；5、伴有淋巴结转移的乳腺癌组织CEACAM1免疫组化染色强度明显低于不伴有淋巴结转移者；6、细胞水平检测结果表明，高侵袭潜能的乳腺癌细胞CEACAM1 mRNA表达明显低于低侵袭或正常乳腺细胞；7、体外侵袭和迁移实验表明，过表达CEACAM1可明显降低乳腺癌细胞BT549和Hs578T的侵袭和迁移能力；8、Western blot检测发现，CEACAM1可引起 MMP2/TIMP2平衡和E-cadherin/N-cadherin平衡改变；9、CEACAM1可下调STAT3和Smad2磷酸化，但不影响总STAT3和Smad2的表达；10、乳腺癌组织微血管密度(MVD)与CEACAM1表达明显负相关；11、过表达CEACAM1的乳腺癌细胞BT549促HUVEC细胞成管能力明显减弱；12、过表达CEACAM1后乳腺癌细胞BT549分泌促血管生成因子VEGF-A明显减少。
　　结论：1、乳腺癌 CEACAM1表达水平明显下调；2、CEACAM1可通过调控MMP2/TIMP2和E-cadherin/N-cadherin平衡，以及诱导EMT逆转进而抑制乳腺癌侵袭和迁移能力；3、CEACAM1通过下调乳腺癌细胞分泌VEGF-A进而抑制乳腺癌血管新生。4、综上，CEACAM1在乳腺癌中可能起到抑癌的作用，因此逆转乳腺癌细胞CEACAM1表达可能成为一个新的治疗策略。

目录

缩 写 词 表

绪论

参 考 文 献

第一部分 CEACAM1在乳腺癌中的表达水平

引言

材料与方法

结果

讨论

参 考 文 献

第二部分 CEACAM1在乳腺癌侵袭转移中的作用及机制研究

引言

材料与方法

结果

讨论

参 考 文 献

第三部分 CEACAM1在乳腺癌血管新生中的作用及机制研究

引言

材料与方法

结果

讨论

参 考 文 献

全 文 小 结

一、本研究发现：

二、本研究的创新点：

三、本研究不足之处：

攻读博士学位期间发表的论文

致谢

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