组蛋白去乙酰化酶抑制剂延缓脂多糖诱导肺纤维化的作用及机制探讨

摘要

内毒素的主要成分脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）为引起急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）和肺纤维化的重要因素。LPS可以通过活化肺成纤维细胞组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，HDAC）而促进肺成纤维细胞的异常增殖和活化，是肺纤维化发生的关键环节。正丁酸为HDAC抑制剂，本研究旨在观察正丁酸抑制 HDAC活化后对 LPS刺激肺纤维化进程的影响及其机制，为 LPS诱导肺纤维化疾病防治手段的探讨奠定理论基础。
　　第一部分：组蛋白去乙酰化酶抑制剂延缓脂多糖诱导肺纤维化作用的评价
　　目的：观察HDAC抑制剂正丁酸延缓LPS诱导肺纤维化过程的作用。
　　方法：将小鼠随机化分为阴性对照组、LPS刺激组和正丁酸预处理+LPS刺激组。制模后2周及4周取小鼠肺组织，检测各组肺组织HDAC活性；用苏木素-伊红（HE）染色和 Masson胶原染色镜下观察肺组织炎症和纤维化情况；并测定肺组织羟脯氨酸含量。
　　结果：与阴性对照组相比，腹腔注射 LPS后肺组织出现明显的炎症反应和纤维化加重，羟脯氨酸含量增加，伴HDAC活化。与LPS刺激组相比，使用正丁酸可以延缓上述过程。
　　结论：LPS诱导肺组织纤维化过程与肺组织HDAC活化有关。HDAC抑制剂正丁酸能通过抑制HDAC活化，从而延缓由LPS诱导的肺纤维化过程。
　　第二部分：组蛋白去乙酰化酶抑制剂延缓脂多糖诱导肺纤维化作用机制的探讨
　　目的：明确HDAC抑制剂正丁酸延缓LPS诱导肺纤维化的机制。
　　方法：将小鼠随机化分为LPS刺激组和正丁酸预处理+LPS刺激组，并设阴性对照组，同样在制模2周及4周后取小鼠肺组织，检测各组肺组织乙酰化组蛋白H3（Acetylated-histone H3，Ace-H3），乙酰化组蛋白H4（Acetylated-histone H4，Ace-H4）和胸腺细胞分化抗原-1（thymocytedifferentiation antigen-1，Thy-1）及各组肺组织Thy-1mRNA表达情况。
　　结果：与阴性对照组相比，腹腔注射 LPS后肺组织组蛋白 H3、H4乙酰化程度降低，Thy-1基因及蛋白表达量降低。与LPS刺激组相比，使用正丁酸可以延缓上述过程。
　　结论：LPS诱导肺组织纤维化过程与组蛋白H3、H4去乙酰化过程以及Thy-1基因表达抑制相关。HDAC抑制剂正丁酸可以抑制组蛋白H4去乙酰化过程，从而延缓由LPS诱导的Thy-1基因表达抑制及肺纤维化过程。

目录

声明

中英文缩写词对照表

第一部分 组蛋白去乙酰化酶抑制剂延缓脂多糖诱导肺纤维化作用的评价

前言

材料与方法

1.实验材料

2.实验方法

结果

1. LPS 诱导的肺纤维化过程中存在 HDAC 活化，HDAC 抑制剂正丁酸能延缓LPS诱导的HDAC活化过程

2. 正丁酸能延缓LPS诱导的肺纤维化过程

讨论

小结

第二部分：组蛋白去乙酰化酶抑制剂延缓脂多糖诱导肺纤维化作用机制的探讨

前言

材料与方法

1.实验材料

2. 实验方法

结果

1. LPS能引起肺组织组蛋白H3，H4去乙酰化过程，该过程能被正丁酸延缓

2. LPS能引起肺组织Thy-1基因和蛋白表达下降，该过程能被正丁酸延缓

讨论

小结

全文总结

致谢

参考文献

攻读学位期间发表论文