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极低频电磁场对部分眼细胞的作用及葛根素的影响

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绪论

第一部分 极低频电磁场中SF细胞MMP-2活性变化及葛根素的影响

1 引言

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果

3.1 ELF-EMF下SF细胞MMP-2活性变化及抑制剂作用

3.2 ELF-EMF下SF细胞MMP-2、CollagenⅠ蛋白变化及抑制剂作用

3.3 ELF-EMF下SF细胞MMP-2活性变化及葛根素作用

3.4 ELF-EMF下SF细胞MMP-2、CollagenⅠ蛋白变化及葛根素作用

4 讨论

1 引言

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果

3.1 ELF-EMF下RPE细胞增殖活性变化及葛根素作用

3.2 ELF-EMF下RPE细胞TGF-β2 mRNA水平及葛根素作用

3.3 ELF-EMF下RPE细胞上清中TGF-β2含量及葛根素作用

4 讨论

第三部分 全文小结与展望

1 小结

2 展望

参考文献

综述:眼细胞在实验性近视的研究进展

致谢

攻读学位期间学术及获奖情况

声明

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摘要

目的:研究极低频电磁场(Extremely low frequency electromagnetic fields,ELF-EMF)作用下巩膜成纤维细胞(Scleral fibroblasts,SF)中基质金属蛋白酶-2(Matrix-metalloproteinases-2,MMP-2)活性与I型胶原(Collagen typeⅠ,CollagenⅠ)含量的变化,视网膜色素上皮细胞(Retinal pigment epithelium,RPE)增殖活性,转化生长因子-β2(Transforming growth factor-β2,TGF-β2)表达与分泌的变化。并观察葛根素对这一过程的干预作用。
  方法:明胶酶谱法检测各组SF细胞中MMP-2酶活性的变化。Western-Blot法检测SF细胞中MMP-2,CollagenⅠ蛋白水平的变化。CCK8法检测RPE细胞的增殖活性。Real-time PCR法检测RPE细胞中TGF-β2 mRNA水平的表达。ELISA法检测RPE细胞培养上清中TGF-β2的蛋白含量。
  结果:辐射组与对照组相比,SF细胞MMP-2活化及蛋白表达增加,CollagenⅠ蛋白表达下降。MMP-2抑制剂组与辐射组相比,SF细胞MMP-2活化及蛋白表达降低,CollagenⅠ蛋白表达升高。葛根素组与辐射组相比,SF细胞MMP-2活性和蛋白表达降低,CollagenⅠ蛋白表达增加。辐射组与对照组相比,RPE细胞增殖活性降低,TGF-β2表达及分泌增加。葛根素组较辐射组相比,RPE细胞增殖活性增高,TGF-β2表达及分泌下降,差异具有统计学意义。
  结论:极低频电磁场促进了SF细胞MMP-2的活化及表达,降解更多的I型胶原,MMP-2抑制剂与葛根素可以抑制MMP-2的活化及表达,减少I型胶原的降解。极低频电磁场抑制RPE细胞的增殖活性并刺激TGF-β2的表达和分泌,而葛根素可以减轻极低频电磁场对RPE细胞的刺激作用。

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