东锦龟耳部感染性疾病(疑似)病菌的试验研究

摘要

本文通过对常见养殖龟类——东锦龟的一起耳部感染性疾病病例的研究,以经典的病原学研究为主要内容和研究方向,将兽医常规研究方法运用到龟类临床常见疾病的研究中,运用分子生物学的研究方法,结合经典的传统菌株鉴定方法,确定菌株的种属,探索了病例中龟类临床常见病原菌,对龟类临床疾病的研究有借鉴意义。
　　龟类的耳部感染性疾病具有耳部单侧或双侧鼓胀、鼓膜腔出现发炎、脓肿或纤维素肿等症状,对于龟类耳部感染性疾病的病因,目前尚无定论。本研究从东锦龟耳部患部分离得到三株细菌,命名为 CPP120505、CPP120505-1、CPP120505-2。人工感染试验采用腹腔注射和浸泡感染两种方式,感染浓度均为3×108CFU/mL。结果显示,巴西彩龟经人工感染后均可发生死亡,死亡率分别为80％和70%,50%和40%,70%和60%,说明三株细菌均对巴西彩龟具有显著的致病性。但是并未出现耳部感染症状,其原因尚不清楚,所以对引起龟类耳部感染性疾病的病因需要进一步的研究。
　　本文通过对分离菌体的营养琼脂培养基菌落形态、血琼脂培养基培养特性和革兰氏染色特性的观察,结合ARIS2x全自动微生物鉴定系统对三株菌株进行生化检测,系统计算出CPP120505为摩尔摩根氏菌(Morganella morganii)的可能性是99.99%,CPP120505-1为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的可能性是98.56%,CPP120505-2是温和气单胞菌(Aeromonas sobria)的可能性是98.96%,可初步鉴定分离得到的三株菌株。从感染病龟体中又分别分离到与原分离菌株相同的细菌。通过CPP120505菌株的16S rDNA基因序列在系统发育树中的位置并与GenBank数据库中摩尔摩根氏菌的16S rDNA基因序列比较,两者具较高的同源性(98.6%-99.2%),从而在分子生物水平进一步鉴定 CPP120505为摩尔摩根氏菌。
　　采用18种药物,通过Kirby-Bauer(K-B)药敏纸片扩散法对分离菌株进行药敏试验,三株菌药敏试验结果相近,均对庆大霉素、妥布霉素、红霉素、链霉素、卡那霉素、氧氟沙星、头孢他啶、哌拉西林、氯霉素敏感,而对头孢唑啉、四环素、阿莫西林、利福平、氨苄西林不敏感,可能与养殖过程中大量使用各种抗生素有关。本研究填补了对龟类耳部感染性疾病病原的基础研究的空白,为龟类耳部疾病的防治提供基础资料和理论依据,为龟类耳部感染性疾病的治疗起到指导性作用。

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第一章 引言

1．东锦龟的生物学特性

2．龟类耳部感染性疾病的研究现状

3．龟鳖类临床常见细菌性疾病的概况

4．本研究的内容和意义

第二章 东锦龟耳部感染性疾病病菌的分离及鉴定

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

第三章 东锦龟耳部感染性疾病（疑似）病菌的药敏试验

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

第四章 龟类耳部感染性疾病治疗的临床实践

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

小结与展望

参考文献

课题资助情况

攻读硕士学位期间发表的学术论文

致谢