过氧乙酸对池塘水体的增氧抑菌抑藻效果研究

摘要

随着养殖规模的不断扩大，养殖环境日趋恶化，各种病菌和有害藻类大量增加，水生动物病害和水质环境日渐严重。然而常用杀菌和抑藻药物的副产品和药物残留严重威胁了水产品安全，对人身健康造成极大危害。市场上没有一种既能杀灭病菌又对环境和养殖动物没有危害的药物。 过氧乙酸是过氧化物，分子结构不稳定，氧化产生氧气，增加水体的溶氧。本试验在10、20、30℃下，用多功能水质分析仪检测过氧乙酸（15%）在池塘水和蒸馏水中的放氧效果，试验结果发现，过氧乙酸的分解放氧速度与温度和不同介质关系明显，温度越高放氧越快，但温度越高氧气的饱和量越低，气体外溢，所以测出数值低。过氧乙酸在池塘水中10℃时4 h达到放氧的最大值14.145mg/L，20℃时3 h达到最大值13.585 mg/L，30℃时2 h就以到达最大值9.440 mg/L。 本试验采用滤纸片法和二倍稀释法通过过氧乙酸和3种常用杀菌剂对6种常见水产病原菌的抑菌效果比较，发现过氧乙酸对不同水产动物病原菌的抑制效果不同，腐生葡萄球菌对过氧乙酸表现出最强的抑菌效果。四种常用药物的抑菌效果排序为恩诺沙星>过氧乙酸>聚维酮碘>高锰酸钾。 用过氧乙酸对铜绿微囊藻和小球藻进行毒杀，检测不同时间段内pH的变化情况，每隔24 h取一次样，用分光光度计法测定叶绿素a含量，用试剂盒测定藻类超氧化物歧化酶（SOD）的活性和丙二醛（MDA）的含量变化。 结果表明，不同浓度的过氧乙酸对铜绿微囊藻和小球藻酸碱度的变化明显，在过氧乙酸的胁迫作用下，pH值逐渐下降，浓度越高越明显，起始铜绿微囊藻和小球藻的浓度为1.0×107 cells/mL，96 h后10 mg/L组铜绿微囊藻和小球藻的浓分别度为2.8×105 cells/mL和3.0×105 cells/mL。说明过氧乙酸导致小球藻死亡，进而影响pH值的变化。通过pH的变化情况，可以分析出过氧乙酸对藻的杀灭效果。 在加入过氧乙酸24 h，铜绿微囊藻和小球藻的试验组与对照组出现了差异,随着浓度的加大差异也逐渐增大。各组试验的叶绿素a含量基本上都呈现出下降的趋势，而对照组一直保持上升趋势。试验组0.31 mg/L和0.63 mg/L组出现低浓度促进其增长，但是随着时间的延长，则出现了抑制现象。其它试验组叶绿素a均呈现出下降趋势，且与对照组比较，叶绿素a的差异明显。 本试验研究表明在过氧乙酸环境下可诱导铜绿微囊藻和小球藻产生SOD和MDA，随着时间的推移，实验组铜绿微囊藻和小球藻SOD和MDA的活性呈现低浓度先升高后降低，高浓度直接降低的趋势。而对照组藻丝体SOD和MDA的活性基本保持稳定，可能是因为营养液对藻类的应激反应有一点浮动。处理48 h后，除了0.31 mg/L和0.63 mg/L组的SOD活性在增长外，都开始降低。MDA的含量，在96 h内各个试验组和对照组均呈先增长后下降的趋势，并且浓度越大，MDA含量越高。过氧乙酸为1.25 mg/L和0.63mg/L浓度时铜绿微囊藻和小球藻的丙二醛含量与对照组差异开始明显。说明试验组藻类由于受到胁迫，细胞遭到破坏。 试验用不同浓度的过氧乙酸对采自上海海洋大学滨海养殖基地池塘的黄丝藻进行毒杀，24 h采样一次，用光学显微镜观察黄丝藻藻丝体外部结构和内部叶绿素的变化，用分光光度计法测定植物细胞中叶绿素a（Chla）含量，用相应的试剂盒测定黄丝藻超氧化物歧化酶（SOD）的数值和丙二醛（MDA）的数值变化。 结果表明，随着时间的推移加入过氧乙酸的试验组水体开始混浊，藻丝体开始断裂，叶绿素 a（Chla）含量开始减少，浓度越高越明显。浓度为0.5 mg/L的试验组和对照组的叶绿素a的含量升高，差异不明显，96 h才开始下降。其它浓度的试验组叶绿素 a含量均呈下降趋势，且与对照组比较，叶绿素 a的差异明显。 随着时间的推移，黄丝藻藻丝体SOD的数值变化，呈现出先上升后下降的趋势。而对照组藻丝体SOD的活性也先升高后降低，可能与藻类对营养液的应激反应有关。处理72 h后。除了10 mg/L的SOD活性在增长外，都开始降低。96 h实验组与对照组差异不大。试验组MDA含量明显高于对照组，96 h各个试验组呈先增长后下降的趋势，并且浓度越大，MDA含量越高。2 mg/L浓度开始与对照组差异开始明显。说明试验组黄丝藻藻丝体由于受到胁迫，细胞遭到破坏程度最严重。 采用静态急性毒性试验方法，用过氧乙酸对不同规格的团头鲂和南美白对虾进行急性毒性试验。结果显示过氧乙酸对1.66 cm组和2.94 cm组试验团头鲂的24hLC50为3.950mg/L和8.320 mg/L，48hLC50为2.430 mg/L，5.240 mg/L，安全质量浓度为0.480 mg/L和2.150 mg/L。过氧乙酸对1.42 cm组和2.53 cm组试验南美白对虾的24 hLC50为1.245 mg/L和34.150 mg/L，48 hLC50为0.834 mg/L，26.740mg/L。安全质量浓度为1.105mg/L和8.180 mg/L。 综合分析，过氧乙酸在水产养殖中在抑制单胞藻和丝状藻的同时，可以杀灭养殖水体的病原菌，又能对水体起到增加氧气的作用。在安全浓度范围内对鱼虾没有危害，是一种安全可靠的产品。

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引言

第一章过氧乙酸在水产养殖中的应用研究进展

1过氧乙酸的理化性质和杀菌机理

2过氧乙酸在水产养殖中的应用

3影响过氧乙酸在水产养殖中作用的因素

4过氧乙酸的生产工艺

5结束语

第二章过氧乙酸对池塘水体的增氧抑菌抑藻效果研究

1 试验材料

2 试验方法

3 结果

4 讨论

第三章过氧乙酸抑制黄丝藻藻华的试验研究

1 试验材料

2试验方法

3结果

4 讨论

第四章过氧乙酸对鱼、虾的急性毒性试验研究

1 试验材料

2 试验方法

3结果

4讨论

小结与展望

参考文献

致谢