生发酊对C57BL/6小鼠毛发生长作用的实验研究

摘要

目的：
　　 本课题旨在观察生发酊对动物模型小鼠毛发的生长周期、毛囊内细胞凋亡的影响，评价其治疗脱发的疗效并探讨其作用机理，并为进一步扩大该方的临床治疗范围提供有力的实验依据。
　　 方法：
　　 （1）取40只近交系C57BL/6小鼠，按小鼠体重编号，后采用随机排列表法随机分为生发酊组、阳性对照组、阴性对照组、模型对照组，每组10只。经乙醚麻醉后用松香/石蜡混合物（1:1）热融化后，涂于小鼠背部，待凝固变硬后揭去，以小鼠背部光滑，无伤无毛根为净，诱导其毛发由休止期进入生长期，脱毛面积约2×2cm2。脱毛后第2天起分别于脱毛区涂抹生发酊、宝发堂六味防脱生发酊、75％酒精，每日两次，每次0.2ml/只，模型组不涂任何药。自涂药后第2天起，观察小鼠背部脱毛部位皮肤每天颜色的变化确定毛囊的生长状态，以及肉眼直观观察脱毛区毛发生长情况。每日对每鼠脱毛区新毛生长状况评分一次。
　　 （2）实验第17天各组颈椎脱臼处死8只小鼠，背部平行脊柱相同部位取材，10％甲醛固定，脱水，石蜡包埋，切片，HE染色，封片，光镜下进行毛囊形态学分期，每只小鼠随机选择50个毛囊，确定各组毛囊所处的周期，计算平均毛发周期评分及生长期VI期、退行早期、退行中期、退行晚期毛囊所占百分比。
　　 （3）于拔毛后第17天在各组处死小鼠脱毛部位平行于脊柱相同部位取材，10％甲醛固定，脱水，石蜡包埋，切片，铺片于多聚赖氨酸载玻片上，用原位杂交技术TUNEL法检测毛囊内细胞凋亡状况。切片置光镜下观察，标记为褐黄色的物质即为凋亡小体，每张切片选染色最强的部位400倍镜下观察5个视野，计数每个视野中的凋亡小体并取其均数。
　　 （4）各组预留2只小鼠观察40天并记录背部毛发生长情况。
　　 结果：
　　 实验过程中生发酊组、阳性对照组比阴性对照组、模型对照组小鼠背部皮肤变黑时间较早，毛发生长速度较快，差异具有统计学意义（P＜0.01），生发酊组与阳性对照组比较无显著性差异（P＞0.05）。造模后第17天，生发酊组与阳性对照组毛囊周期评分明显小于阴性对照组与模型对照组（P＜0.01）,生发酊组与阳性对照组比较无显著性差异（P＞0.05）。生发酊组与阳性对照组细胞凋亡数量明显少于阴性对照组与模型对照组（P＜0.01）,生发酊组与阳性对照组比较无显著性差异（P＞0.05）。
　　 结论：
　　 生发酊对C57BL/6小鼠具有显著的促进毛发生长、延长毛囊生长周期、减少毛囊内细胞凋亡的作用。