热敷药糊剂对硬皮病小鼠模型Ⅲ型胶原、IL-6含量的实验研究

摘要

目的：通过研究硬皮病小鼠模型白介素6(IL-6)和Ⅲ型胶原在“热敷药”治疗后含量的变化，为“热敷药”抗纤维化、硬化以及治疗硬皮病提供实验依据。
　　 方法：试验用博来霉素造模方法，选取60只BALB/c小鼠随机分为2组，空白组10只，实验组50只，均剃去背部相同部位皮毛，面积1.5×1.5cm大小。模型组在小鼠备区皮下注射浓度为200μg/ml的博莱霉素磷酸缓冲液，每次0.1ml，空白组注射磷酸缓冲液每次0.1 ml，均每日1次。连续注射5周。造模成功后，将“热敷药”粉熬成浓度分别为40％、20％、10％的药糊。将实验组共50只小鼠随机分为西药组、模型组及高、中、低浓度组，每组各10只，在背部皮损处分别外涂40％、20％、10％热敷药药糊，西药组用肝素钠软膏，模型组不用药。以上用药物外涂前均加热至25-30℃(模拟人用药时的温度)然后外涂，1次/日(模型组不用药)，连续1月。用药结束后采用心脏采血法采血后以脊椎脱臼法处死，采血后加抗凝剂保存，用IL-6试剂盒分析用药后各组IL-6的变化；切取背部皮损组织用10％甲醛液固定。然后脱水、染色、采用免疫组化法检测各组Ⅲ型胶原蛋白的含量。观察用药组组织的一般形态及病理变化并与空白组及模型组的皮损的形态，外周血IL-6、Ⅲ型胶原含量做比较，研究“热敷药”糊剂对硬皮病小鼠模型该两项指标的影响。
　　 结果：Ⅲ型胶原：各组相互比较显示，高中浓度组含量与空白组无差异(P＞0.05)；模型组与西药组、低浓度组无差异(P＞0.05)；西药组与低浓度组、(P＞0.05)，中浓度组与高浓度组无差异(P＜0.05)。其余均有差异说明中、高浓度组有降低Ⅲ型胶原表达的作用且高浓度组优于中浓度组。IL-6：空白组除与高浓度组无差异(P＞0.05)外与其余各组均有差异；模型组与西药组、低浓度组无差异(P＞0.05)；西药组与低浓度组无差异(P＞0.05)。表明高浓度组对IL-6有降低作用。
　　 结论：硬皮病小鼠经“热敷药”糊剂外用后，中浓度组及高浓度组的Ⅲ型胶原含量减少，且疗效随浓度增高而增强。高浓度组可减少外周血中IL-6的含量。其余组对该两项指标无明显影响。