中国小球隐孢子虫hemA同源基因的克隆表达及其生物活性研究

摘要

该研究采用流行病学和分子生物学技术对我国部分城市隐孢子虫病的发病情况进行了调查,同时收集中国人感染的隐孢子虫卵囊,对隐孢子虫致病相关基因hemA基因进行了深入的研究.该研究应用改良抗酸染色法检验腹泻患者粪便标本中隐孢子虫卵囊,并以该方法作为诊断手段进行隐孢子虫病的调查,同时收集隐孢子虫卵囊标本.该研究建立了饱和蔗糖溶液浮--磷酸锌沉淀法,将隐孢子虫卵囊从隐孢子虫病患者粪便中纯化出来.该研究成功地构建了hemA基因的原核载体,经诱导表达,纯化,复性和浓缩处理,通过SDS-PAGE电泳分析证实,得到了纯化的hemA基因编码的蛋白,蛋白分子量约为29KDa.溶血实验结果:因构建的表达载体属非分泌型表达,带有表达载体的宿主菌不能在血平板上形成溶血环,其上清和沉淀亦不能使羊血红细胞发生裂解.表达产物经纯化,复性和浓缩处理后,浓度206μg/L的表达产物可使48.80﹪的羊血红细胞发生裂解,证明其具有明显的溶血活性.

目录

英文略语中英文全名对照表

前言

第一部分隐孢子虫卵囊的收集与纯化

第二部分中国小球隐孢子虫hemA基因的克隆与表达

第三部分hmA同源基因表达的检测及生物活性观察

结语

参考文献

综述

致谢