蛋白质组学研究脉冲电场诱导对中国红豆杉细胞蛋白表达的影响

摘要

本文通过蛋白质组学研究脉冲电场作用后48小时中国红豆杉细胞在蛋白表达上的变化。共进行了3次二维电泳重复实验，经过相关因子分析证实具有较高的重复性。图像分析比较对照组和经过脉冲电场处理的实验组的二维电泳图谱，发现有较明显的差异。从蛋白质分子水平上，说明脉冲电场的刺激对红豆杉细胞的蛋白质表达水平有明显的影响。用基质辅助激光解析-飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)和液相色谱-电喷雾质谱(ESIMS)对其中部分发生变化的蛋白进行分析鉴定。鉴定结果表明：核糖核酸蛋白粒、醛糖差向异构酶和铁氧还蛋-NADP(+)还原酶这三个蛋白可能是与脉冲电场诱导相关的蛋白。

目录

文摘

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第一章绪论

1.1紫杉醇及相关紫杉烷类化合物

1.2紫杉醇的自然资源状况及其替代生产方式

1.3蛋白质组学简介

1.4本研究的意义和主要内容

参考文献

第二章脉冲电场对中国红豆杉细胞生长和紫杉烷积累的影响

2.1前言

2.2材料和方法

2.3场作用最佳条件探索

2.4脉冲电场和补糖的组合策略进一步促进紫杉烷的积累

2.5脉冲电场和化学诱导剂的联合作用对细胞培养的影响

2.6脉冲电场对胞外物质积累的影响

2.7脉冲电场作用机制的探讨

2.8总结

参考文献

第三章用反转录扩增(RT-PCR)和荧光定量PCR技术检测脉冲电场对TC生物合成关键酶的基因转录水平的影响

3.1前言

3.2材料和方法

3.3结果与讨论

参考文献

第四章二维电泳的方法以及可信度的研究

4.1前言

4.2材料和方法

4.3结果和讨论

参考文献

第五章图像分析研究脉冲电场诱导后中国红豆杉细胞蛋白表达的变化

5.1前言

5.2实验方法

5.3结果和讨论

参考文献

第六章质谱鉴定分析与脉冲电场作用相关的中国红豆杉细胞的蛋白

6.1前言

6.2实验方法

6.3结果与讨论

参考文献

第七章结论与展望

7.1结论

7.2展望

附录

一、红豆杉相关蛋白及其信息(等电点/分子量)

二、实时荧光定量PCR(Real time PCR)简介

攻读硕士学位期间发表的论文

感谢