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氯霉素乙酰转移酶突变体检测氯霉素

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摘要

综述

实验部分

一.材料和方法

二.结果与讨论

结论

参考文献

论文发表情况

致谢

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摘要

本课题通过参考当前关于CAT酶的结构和功能研究进展,利用基因工程手段对野生型cat基因进行定点突变,使其蛋白产物催化活性丧失而结合活性基本不变,并构建重组载体转化大肠杆菌,得到了可高效稳定表达的重组菌株。而且由于表达出来的氯霉素乙酰转移酶NH2基端带了可和Ni柱结合的HisTag序列,简化了纯化工艺,大大降低了成本。最后,对酶的“竞争性ELISA曲线”进行了初步探索,证明突变型氯霉素乙酰转移酶应用于检测氯霉素是可行的,同时也为构建新型的氯霉素检测试剂盒提供了一种新的思路。

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