基于药物代谢酶的中药相互作用研究

摘要

细胞色素P450酶作为人体重要的I相药物代谢酶系统，对药物代谢和药物之间的相互作用有着重要影响。当药物联合应用时经常发生的药物相互作用就是由于一种药物通过诱导或抑制P450酶特定的亚型，从而改变了另一种药物的代谢清除特性，导致不利于机体的药物相互作用，有时甚至产生致命的药物相互作用。近年来基于P450酶的药物相互作用及对P450酶调控机制的研究越来越受到重视。随着中药使用的日益广泛，中药的安全性和不良反应问题逐渐显现。中药以合并用药为主且其中许多成分或许为P450酶的底物、诱导剂或抑制剂，因此有可能存在基于P450酶的中药相互作用。本论文将现代药理学中药物相互作用的分子基础P450酶引入中药相互作用的研究，对十八反中各组药物与药物代谢酶的关系进行了较系统的研究，为揭示一类基于药物代谢酶的中药相互作用模式，阐明中药配伍产生相反作用的分子机制和中药十八反配伍禁忌的科学内涵提供了实验依据。 结果显示中药丹参、苦参、人参及其与藜芦合用后均不同程度的抑制了P450酶含量和主要的药物代谢酶CYP3A及CYP2E1的酶活性，提示可能正是由于三种中药与藜芦配伍后对药物代谢酶的抑制作用减缓了剧毒中药藜芦中相关物质的代谢，导致毒性增加，产生了不期望的中药相互作用。瓜蒌、白及、半夏、贝母与乌头合用按作用强度顺序对CYP3A和CYPlA2在基因、蛋白和酶活性水平均产生不同程度抑制作用。用LC／MS技术结合体外代谢实验鉴定了乌头碱的6个代谢产物，构效关系分析显示代谢物毒性降低，HPLC结合代谢抑制实验显示参与乌头碱代谢的P450亚酶为CYP3A和CYPlA2。综合分析结果表明对于心脏和神经系统的毒性很可能是由于对CYP3A和CYPlA2的抑制作用减缓了乌头碱的代谢速率并提高了其血药浓度，产生了不期望的中药间相互作用。从另一个侧面为十八反中关于乌头不能与这些中药配伍的理论提供了基于药物代谢酶层面的实验证据。甘草及其与海藻、大戟、甘遂、芫花配伍均对CYP3A的mRNA表达和酶活性产生了诱导作用，特别是海藻、大戟及芫花与甘草合用。甘草对CYP3A的诱导效应必然加速毒性中药的相关成分代谢，我们认为本组的药物相反作用更多的体现为甘草通过CYP3A的诱导效应对上述毒性中药的药效减低或消除作用。继而研究了甘草诱导CYP3A表达的调控机制，在细胞水平上甘草甜素能浓度依赖性的诱导CYP3AmRNA及蛋白的表达，报告基因实验显示甘草甜素通过增加PXR受体的转录激活活性进而促进CYP3A诱导表达增加。表明甘草甜素正是通过核受体PXR产生了其对CYP3A的诱导作用，并且这一过程受PKC途径调节。综合以上结果，认为中药配伍中存在基于药物代谢酶的中药相互作用，这种相互作用模式表现为中药对P450酶的诱导或抑制，受调控的P450酶再作用于配伍的其他中药，改变这些中药中相关成分的代谢特征，产生中药间的相互作用。

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英文缩略语

摘要

前言

主要仪器设备和常用试剂配制

第一部分中药丹参、苦参、人参及其与藜芦合用对大鼠肝P450酶活性及mRNA表达的调控作用

第二部分基于药物代谢酶的中药乌头与半夏、贝母、白蔹、瓜蒌、白及配伍的相互作用研究

第三部分中药海藻、大戟、甘遂、芫花与甘草合用产生相反作用的筛选及机制探索

总结

参考文献

致谢

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