腺病毒介导hIL-10基因转染联合IFN-γ抑制血管平滑肌细胞增殖及其机制的研究

摘要

白细胞介素(interleukin,IL)-10和γ干扰素(interferon-γ，IFN-γ)在一定条件下都可以抑制血管平滑肌细胞增殖，但IL-10在体内抑制IFN-γ的产生，削弱IFN-γ的作用，因此设想应用IL-10时补充外源性IFN-γ。本研究构建IL-10的重组腺病毒载体，以腺病毒介导方式给药，观察体外实验的效果。本课题包括三部分： 第一部分从体外培养的外周血单个核细胞克隆人白细胞介素-10cDNA。目的：从体外培养的外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells，PBMCs)克隆人白细胞介素(humaninterleukin,hIL)-10cDNA，为亚克隆及基因治疗研究奠定基础。结论：从PBMC中扩增hIL-10cDNA，克隆至pUCm-T载体，方法较为简便，为进一步进行亚克隆及表达研究提供了可靠的前提条件。 第二部分细菌内同源重组制备携GFP的人白细胞介素-10cDNA腺病毒载体。目的：细菌内同源重组法构建携绿色荧光蛋白(Greenfluorescentprotein,GFP)的hIL-10cDNA重组腺病毒载体。结论：成功构建GFP和hIL-10双表达腺病毒载体，并于VSMC成功表达，为血管再狭窄的基因治疗奠定了基础。 第三部分人白细胞介素-10基因转染联合γ-干扰素抑制血管平滑肌细胞的增殖及其机制。目的：观察人白细胞介素(humaninterleukin,hIL)-10基因转染联合应用γ干扰素(interferon-γ，IFN-γ)对体外培养的血管平滑肌细胞(Vascularsmoothmusclecell，VSMC)增殖的作用，探索理想的抑制血管内膜增生的联合治疗方案。结论：IL-10基因转染联合IFN-γ，对VSMC的增殖抑制具有相加作用，对制定联合方案治疗内膜增生具有指导意义。

目录

前 言

第一部分从体外培养的外周血单个核细胞克隆人白细胞介素-10cDNA

材料与方法

结果

讨论

小结

第二部分细菌内同源重组制备携GFP的人白细胞介素-10cDNA腺病毒载体

材料与方法

结果

讨论

小结

第三部分hIL-10基因转染联合γ-干扰素抑制血管平滑肌细胞的增殖及其机制

材料与方法

结果

讨论

小结

结论

参考文献

致 谢

综述 血管内膜增生机制研究进展

参考文献

发表文章题录

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