转TrkC基因神经干细胞移植治疗脊髓损伤的实验研究

摘要

本研究先将TrkC基因转染到神经干细胞内，然后观察转TrkC基因的神经干细胞在损伤脊髓内的生存、分化和迁移等情况，并研究转TrkC基因的神经干细胞移植对脊髓损伤后神经功能恢复的治疗作用。 通过一定的材料和方法得到以下结果： 成功构建了TrkC-cDNA真核表达质粒，经DNA测序分析证明所获得的目的基因与公布的序列相比，一致性好(99％)。构建出的pEGFP-C1-TrkC质粒经酶切验证证明所获得的重组子符合本研究要求。在NT-3的作用下转TrkC基因神经干细胞的增殖活性有明显增强。采用自创的“三步横旋切法”制作脊髓半切损伤动物模型成功，较好地符合本研究的要求。转TrkC基因神经干细胞移植到半切脊髓内2个月后仍能较好地表达TrkC受体。在NT-3的作用下，转TrkC基因神经干细胞移植到损伤脊髓内后的增殖/生存和向神经元的分化能力得以增强，而向星形细胞的分化减少，其向远处的迁移能力也明显改善，MEP和SEP指标得以显著改善、脊髓运动功能也有较大恢复，提示半切损伤脊髓的上、下行神经传导通路和脊髓前角运动神经环路得到修复。 结论：转染并过度表达TrkC基因并在NT-3的作用下能显著增强神经干细胞在损伤脊髓内的生存、迁移和向神经元分化的能力，并促进损伤脊髓神经上、下行传导功能和运动功能的恢复。通过转基因的方法来增强神经干细胞上神经营养素受体的表达是提高脊髓损伤治疗效果的一条崭新而可行的途径。 创新之处：　　1.转TrkC基因神经干细胞的制备在国内至今未见报道。　　2.本研究采用转TrkC基因的神经干细胞移植与NT-3相结合来治疗脊髓损伤，取得了较为令人满意的效果，国际上尚未见报道。　　3.首次从增加神经干细胞上神经营养素受体的角度来研究神经干细胞对脊髓损伤的治疗作用，角度独特、新颖。

目录

论文说明：主要英文缩写表、资助

前言

第一部分转TrkC基因神经干细胞的制备

材料

方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图（一）

附图（二）

第二部分转TrkC基因神经干细胞移植后在损伤脊髓内存活、分化和迁移情况的研究

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图片（一）

附图片（二）

附图片（三）

第三部分转TrkC基因神经干细胞移植对脊髓损伤后功能恢复的促进作用

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图（一）

附图（二）

神经干细胞移植治疗实验性脊髓损伤的研究进展

附录

致谢

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