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2b干扰素基因与Ag85B基因在毕赤氏酵母中的融合表达研究

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目录

前言

一结核病

二干扰素

三本实验的工作

材料

方法

结果

讨论

参考文献

附录

致谢

论文独创性声明及论文使用授权声明

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摘要

结核分枝杆菌的许多主要的保护性抗原是一些分泌性蛋白,或者一些与细胞壁有关的蛋白质。Ag85是结核分枝杆菌的一种分枝菌酸转移酶复合体,在结核分枝杆菌细胞壁的合成过程中起着重要作用。Ag85B是该复合体的一个组分,具有较好的免疫原性。  a2b干扰素是干扰素家族中的一种,具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节功能等生物学活性,且人的a2b干扰素已在毕赤氏酵母中获得了高效表达。 本研究通过基因工程技术,用连接多肽(G4S)4的编码序列,将a2b干扰素与Ag85U构成融合基因,然后构建毕赤氏酵母表达载体pPIC9-a2bAg85B,转化后获得重组酵母工程菌SMD1168/pPIC9-a2bAg85B,其工程菌经发酵上清液的抗病毒活性测定,WesternBlot鉴定以及表达产物的初步纯化,结果表明,分泌表达的融合蛋白具有一定的抗病毒活性。又经糖基化鉴定表明,分泌表达的融合蛋白有糖基化和未糖基化的两种形态。

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