Polyl：C刺激对慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞分泌Ⅰ型干扰素的影响

摘要

目的： 通过观察慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞(Dendritic Cells，DC)在Toll样受体3(Toll like receptor 3，TLR3)被配体PolyI：C触发后分泌Ⅰ型干扰素的规律，探讨HBV感染在DC功能障碍中的作用机制。 方法： 随机筛选慢性乙型肝炎患者10例，入选时予PCR法测定外周血HBV DNA载量。从患者外周血分离获取单核细胞，诱导培养DCs，对成熟期DCs用PolyI：C(50 mg/ml)刺激，然后收集各时段上清。利用ELISA方法进行DCs分泌干扰素α和干扰素β浓度的测定。同时以10例健康人作对照。 结果： 1、应用AIM-V无血清培养基培养树突状细胞，细胞可以正常增殖。 2、DCs在体外经PolyI：C的刺激，可以分泌少量的α干扰素。CHB患者刺激组在刺激后0、1、4、8、16、24、48小时DCs培养液上清测得的IFN-α浓度分别为(0.12±0.32、0.16±0.36、1.66±0.96、12.22±2.44、9.85±1.49、7.96±2.58、8.59±2.58)pg/ml；健康刺激组测得值为(2.87±4.41、4.21±2.10、3.91±1.79、10.96±4.27、8.92±3.49、10.23±3.39、5.35±1.62)pg/ml，峰浓度无显著性差异，但是CHB患者组维持时间短。 3、DCs在体外经PolyI：C的刺激，CHB患者刺激组在刺激后0、1、4、8、16、24、48小时DCs培养液上清测得的IFN-β浓度分别为(25.03±9.01、27.05±4.69、30.45±8.61、32.10±2.89、32.85±12.28、29.70±6.93、25.37±4.14)pg/ml；健康刺激组测得值分别为(12.38±3.71、36.93±3.81、40.55±4.92、33.30±5.07、32.10±5.80、26.10±4.11、24.77±4.12)pg/ml。CHB患者DCs在TLR3配体触发后分泌β干扰素的能力较健康刺激组明显下降(p<0.05)。 4、CHB患者血浆中IFN-α浓度为(73.97±37.27)pg/ml明显高于正常人(24.90±14.28)pg/ml，有显著性差异(p<0.01)，而CHB患者血浆IFN-β浓度(121.96±17.23)pg/ml 明显低于正常人(237.67±41.73)pg/ml，有显著性差异(p<0.01) 结论： 1、AIM-V培养液可以满足树突状细胞体外培养的实验要求。 2、慢性乙型肝炎患者外周血DCs在PolyI：C触发后分泌α干扰素的能力无显著改变。 3、慢性乙型肝炎患者外周血：DCs在PolyI：C触发后分泌β干扰素的能力下降。 4、慢性乙型肝炎患者血浆α干扰素浓度较正常人高，β干扰素浓度较低。 5、慢性乙型肝炎患者树突状细胞分泌Ⅰ型干扰素的能力下降。

目录

声明

前言

一 材料和方法

二 结果

三 讨论

四 小结

参考文献

Toll样受体及干扰素的表达与病毒性肝炎的免疫调控（文献综述）

附录

后记（致谢）