老年人口咽部带菌情况及细菌耐药性的研究

摘要

正常人的口咽部寄殖草绿色链球菌、奈瑟菌属等需氧菌及消化链球菌等厌氧球菌,在某些特殊人群如老年人、具有基础疾病者或患有重症疾病者,也可携带嗜血杆菌属、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等革兰阴性杆菌及念珠菌属等真菌。老年人口咽部细菌携带率较年轻人增加。由于老年人咽喉反射减退及吞咽障碍等生理变化,使吸入机会明显增加,而老年人的免疫功能降低,吸入口腔分泌物后清除能力减弱,易导致肺部感染发生,故老年人口咽部带菌状态与肺炎的发生有密切关系。分析口咽部携带菌的种类及药物敏感性,对于老年人肺部感染的防治,降低感染的病死率具重要作用。
　　 本研究调查了105例老年非感染住院患者及501例健康体检老年人口咽部的带菌情况,分析细菌耐药性情况,对带菌的危险因素进行多因素回归分析,并进行两组比较;同时对革兰阴性杆菌对β内酰胺类抗菌药的主要耐药机制—超广谱β内酰胺酶及头孢菌素酶进行了研究。
　　 第一部分老年人口咽部带菌情况调查
　　 目的：了解老年非感染住院患者及健康体检老年人口咽部细菌携带及其耐药情况、细菌携带的危险因素,以利于老年人呼吸道感染的防治。
　　 方法：105例老年非感染住院患者及501例健康体检老年人为调查对象。以无菌生理盐水漱口后,采集咽拭子,进行细菌培养及鉴定。以纸片扩散法进行药敏测定。
　　 结果：105例老年非感染住院患者中58例口咽部分离到细菌或真菌,携带率为55.2％(58/105);获分离菌62株,包括革兰阴性杆菌56株,占所有分离菌的90.3％;革兰阳性球菌5株(8.1％);白色念珠菌1株(1.6％)。
　　 501例健康体检老年人中161例口咽部分离到细菌,携带率为32.1％(161/501);获分离菌161株,包括革兰阴性杆菌147株,占所有分离菌的91.3％,革兰阳性球菌14株(8.7％)。
　　 嗜血杆菌属为最常见的老年人口咽部携带菌,老年非感染住院患者及健康体检老年人携带嗜血杆菌属分别占革兰阴性杆菌的60.7％(34/56)及66.7％(98/147),携带嗜血杆菌属对抗菌药均高度敏感,两组携带的嗜血杆菌属对各抗菌药的敏感率相仿(P＞0.05)。
　　 老年非感染住院患者组分离的10株肺炎克雷伯菌对哌拉西林、头孢噻肟、庆大霉素及阿米卡星的敏感率均为60％,其中4株产超广谱β内酰胺酶,对上述抗菌药呈现耐药。健康体检老年人组分离的40株肺炎克雷伯菌对各类抗菌药的敏感率高(95％～100％),除环丙沙星外,老年非感染住院患者组携带10株肺炎克雷伯菌对各种抗菌药的敏感性均低于健康体检老年人组(P＜0.05)。
　　 所有105例老年非感染住院患者及501例健康体检老年人均有1个或1个以上基础疾病如冠心病、糖尿病、恶性肿瘤、中风等中枢神经系统疾病。老年非感染住院患者具冠心病、中枢神经系统疾病者、恶性肿瘤、使用化疗药和激素及近期使用抗菌药的比例均高于健康体检老年人(P＜0.05)。
　　 老年非感染住院患者中,带菌组与非带菌组各有72.4％及48.9％有口腔义齿;健康体检老年人两组各有69.6％及52.1％有口腔义齿。多因素回归分析显示,不管是老年非感染住院患者还是健康体检老年人,口腔装有义齿是老年人口咽部带菌的危险因素(P＜0.05)。
　　 结论：老年人口咽部细菌携带率高,老年非感染住院患者口咽部细菌携带率高于健康体检老年人,主要携带菌为革兰阴性杆菌,口腔义齿是老年人口咽部带菌的危险因素。
　　 第二部分老年人分离革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶及头孢菌素酶的研究
　　 超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrumβ-Lactamases,ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)的产生是肠杆菌科细菌对广谱头孢菌素、氨曲南等β-内酰胺类抗生素耐药的重要原因。近年来临床分离菌ESBLs的产生率明显上升,对于产ESBLs及AmpC酶细菌感染的治疗药物有限,增加了医疗费用支出,给临床治疗和院内感染控制造成极大的困难。对于ESBLs的具体基因型,世界各地研究报告有所差异;对于质粒AmpC酶的型别,世界各地研究报告大致相同,主要为DHA-1型,其次为CMY-2型。
　　 目的:了解华山医院老年人临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌ESBLs和质粒AmpC酶的产生率及其主要基因型。
　　 方法:老年人临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌经双纸片确认试验检测ESBLs。以PCR方法检测CTX-M基因型ESBLs,以了解CTX-M基因型在所有ESBLs中所占比例;同时用PCR检测所有细菌的AmpC酶。随机挑选部分ESBLs阳性及全部AmpC阳性的PCR产物进行DNA测序。
　　 结果:246株肺炎克雷伯菌中ESBLs及AmpC的检出率分别为68.7％(169/246)及1.6％(4/246)。231株大肠埃希菌中ESBLs及AmpC酶的检出率分别为67.1％(155/231)及3.9％(9/231)。
　　 169株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中有140株的基因型为CTX-M,占82.8％(140/169);155株产ESBLs的大肠埃希菌中有112株为CTX-M型,占72.3％(112/155)。
　　 随机挑选ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌28株及大肠埃希菌22株的PCR产物进行测序,结果显示,除1株大肠埃希菌产CTX-M-65型ESBL外,其余均为CTX-M-14型ESBLs。4株肺炎克雷伯菌产生的AmpC酶基因型均为DHA-1,9株大肠埃希菌产生的AmpC酶均为CMY-2。
　　 结论:老年人分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中ESBLs产生率高,ESBLs以CTX-M基因型为主;AmpC酶的产生率低于4％,主要基因型为CMY-2及DHA-1。对于老年人肺炎,应及时送检痰培养,根据药敏结果选用敏感抗菌药物。