RGS-2与形觉剥夺性近视巩膜胶原改变的相关研究

摘要

近视在全球青少年人群中的发病率约为50％。高度近视会产生如白内障，青光眼，视网膜脱离以及黄斑变性等严重的致盲性并发症。近视受从视网膜到脉络膜到巩膜这一通路的局部机制调控。巩膜成纤维细胞在巩膜重塑以及眼轴延长中起重要作用。阿托品是M受体阻滞剂，可以有效地延缓近视的进展，但其作用机制不明。M受体是G蛋白偶联受体，在近视眼发展中起终止信号的作用。RGS2在阻断M受体信号通路中起调节作用。在心脏组织中，RGS2可以作用于成纤维细胞而调控胶原的表达。在巩膜组织中RGS2也可能作用于巩膜成纤维细胞。本文拟在探讨RGS2及胶原在形觉剥夺性豚鼠巩膜中的改变，以及使用阿托品干预近视模型后RGS2以及胶原的改变。
　　目的: 观察形觉剥夺性近视以及阿托品干预后的形觉剥夺性近视豚鼠巩膜中RGS-2及Ⅰ型胶原的改变。
　　方法: 取两周龄豚鼠120只，随机分成四组，遮盖组，对照组，阿托品组和生理盐水组，每组30只。选取右眼为实验眼。遮盖组，阿托品组，生理盐水组以半透明眼罩遮盖右眼，左眼为自身对照，不做处理。阿托品组和生理盐水组形觉剥夺的同时玻璃体腔注射阿托品或生理盐水。对照组为正常对照，不做任何处理饲养一月。4周后用带状光检影镜检影验光，用A超检测前房深度，晶状体厚度以及眼轴长度，HE染色观察豚鼠后极部巩膜的改变，Real-time PCR以及Western blot检测巩膜RGS2和Ⅰ型胶原在基因及蛋白水平的表达。
　　结果: 4周后遮盖组产生相对近视为（-4.38±0.23）D，玻璃体腔深度延长（0.15±0.04）mm，眼轴长度增加（0.18±0.02）mm，与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05)。生理盐水组产生相对近视为（-3.24±0.27）D，玻璃体腔深度延长（0.13±0.03）mm，眼轴长度增加（0.13±0.03）mm，与阿托品组相比差异有统计学意义(P＜0.05)。HE染色显示，形觉剥夺组与对照组相比巩膜变薄(P＜0.05);生理盐水组与阿托品组相比巩膜变薄(P＜0.05)。Real-time PCR，Westernblot显示形觉剥夺组与对照组相比巩膜中RGS2在基因及蛋白水平表达升高(P均＜0.05);生理盐水组与阿托品组相比RGS2在基因及蛋白水平表达升高(P均＜0.05)。Real-time PCR，Westernblot显示形觉剥夺组与对照组相比巩膜中Ⅰ型胶原在基因及蛋白水平表达降低（P均＜0.05）;生理盐水组与阿托品组相比Ⅰ型胶原在基因及蛋白水平表达降低（P均＜0.05）。
　　结论: 形觉剥夺性近视豚鼠巩膜RGS2表达升高，Ⅰ型胶原表达降低。阿托品干预后，形觉剥夺性近视豚鼠近视程度减轻，巩膜中RGS2表达减少，Ⅰ型胶原表达升高。RGS2可能是阿托品延缓近视进展作用中的关键因子，可能调控胶原的表达。

目录

英文缩略语注释

摘要

前言

1 材料和方法

1．1 实验动物及分组

1．2 实验材料

1．3 实验方法

1．4 统计学分析

2 结果

2．1 屈光参数

2．2 免疫组织化学观察后极部巩膜厚度的变化

2．3 Real-time PCR、Western blot检测巩膜RGS2基因和蛋白水平表达

2．4 Real-time PCR、Western blot检测巩膜Ⅰ型胶原基因和蛋白水平的表达

3 讨论

4 结论

参考文献

全文总结

综述 近视与巩膜胶原关系的研究进展

致谢

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