注射用多西他赛聚合物胶束的研究

摘要

多西他赛（docetaxel，DTX）是一种半合成的新一代紫杉烷类抗肿瘤药物，在临床上主要被用于乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌等多种癌症的治疗。由于DTX的水溶性差，目前市售的注射剂中均加入吐温-80作为增溶剂，容易引起过敏反应等严重的不良反应，且DTX的组织分布选择性差，会导致全身毒性。因此，开发高效、低毒的新型DTX注射剂受到广泛关注。聚合物胶束作为一种新型的纳米药物载体，具有很多优势，如具有纳米级粒径（10～100 nm）、增加难溶性药物的溶解度和稳定性、延长药物的体内循环时间、EPR效应介导的被动靶向作用等。目前聚合物胶束已成为改善难溶性细胞毒药物临床安全性和有效性的重要手段。本课题研制了一种新型的DTX聚合物胶束冻干制剂，并对其理化性质、体外释药特性、药动学、组织分布和药效学进行评价。
　　本研究以采用疏水性基团 Boc-苯丙氨酸（BP）进行封端修饰的两亲性嵌段共聚物mPEG-PLA-BP作为载体材料，采用薄膜分散法制备了DTX聚合物胶束。以粒径、包封率与载药量为评价指标，进行单因素考察；在此基础上，采用正交设计进一步优化了胶束制备的处方与工艺。在最优处方与工艺的基础上，以甘露醇为冻干保护剂，釆用冷冻干燥工艺制备得到了DTX胶束冻干粉针。对DTX胶束的理化性质进行了研究，采用芘探针荧光法测得mPEG-PLA-BP的临界胶束浓度为1.85×10-5 mol/L；采用高效液相色谱法测得载药胶束的包封率为96.19±1.31％，载药量为4.82±0.06%；透射电镜下观察到载药胶束呈球形或类球形，分布均匀；动态光散射法测得载药胶束的平均粒径为21.6±0.7 nm，多分散系数PDI为0.032±0.008；体外稳定性试验表明，经复溶后的DTX胶束溶液可在室温放置8 d内保持稳定。采用透析法研究了DTX胶束和普通注射液在含0.5%（w/v）吐温-80的磷酸盐缓冲液（pH7.4）中的体外释药行为。结果表明，DTX注射液释药速度较快，12 h内药物已基本释放完全，而DTX胶束在72 h内的累积释放率仅为83.34%，表现出明显的缓释特性，其释药动力学过程符合Weibull方程。建立了大鼠血浆中DTX药物浓度测定的LC-MS/MS法，并进行了系统的方法学验证。结果表明，该方法简便快速、灵敏、准确，适用于测定DTX在大鼠血浆中的药物浓度。在此基础上，考察了大鼠分别注射给予等剂量DTX胶束和普通注射液后DTX的血浆药动学特性。结果显示，与注射液相比，DTX胶束的AUC显著增加，MRT和T1/2均明显延长，表明本文研制的DTX聚合物胶束能够增加体内药物暴露水平，延长药物在体内的循环时间。建立了小鼠主要组织中DTX药物浓度测定的LC-MS/MS方法，并进行了系统的方法学验证。结果表明，该方法简便快速、灵敏、准确，适用于测定DTX在小鼠主要组织中的药物浓度。在此基础上，考察了小鼠分别注射给予等剂量DTX胶束和普通注射液后 DTX的组织分布特性。结果显示，与注射液相比，胶束组在血浆、肺、胃中具有较高的药物浓度，而在心、肾、脑中的药物分布量有所减少，提示聚合物胶束可在一定程度上提高DTX组织分布的特异性和靶向性。建立了人肺癌A549裸小鼠皮下移植瘤模型，并对比研究了DTX胶束和普通注射液抗肿瘤作用的量效关系。结果表明，DTX胶束和注射液均对人肺癌 A549裸小鼠移植瘤具有显著的生长抑制作用，且呈现出一定的剂量依赖性；但DTX胶束的抑瘤效果明显优于等剂量的普通注射液。综上所述，本课题研制的DTX聚合物胶束包封率与载药量较高，外观形态规整，粒径较小且分布范围较窄，具有良好的体外稳定性。在体内，该聚合物胶束能够延长DTX在体内的循环时间，具有缓释作用；提高其组织分布的特异性和靶向性；提高其体内抗肿瘤效果，同时可避免使用吐温-80所引起的毒副反应。因此，作为一种新型的DTX注射剂，本课题研制的DTX聚合物胶束极具深入开发潜力。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

目录

符号说明

1 绪 论

1.1 多西他赛的研究现状

1.2 聚合物胶束的研究概述

1.3 本课题的立题依据与主要研究内容

2 多西他赛聚合物胶束的制备与制剂学性质研究

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 实验结果

2.4 讨论

2.5 本章小结

3 多西他赛聚合物胶束的体外释放实验

3.1 实验材料

3.2 实验方法

3.3 实验结果

3.4 讨论

3.5 本章小结

4 多西他赛聚合物胶束的药动学研究

4.1 实验材料

4.2 实验方法

4.3 结果与讨论

4.4 本章小结

5 多西他赛聚合物胶束的组织分布实验

5.1 实验材料

5.2 实验方法

5.3 结果与讨论

5.4 本章小结

6 多西他赛聚合物胶束的药效学研究

6.1 实验材料

6.2实验方法

6.3 结果与讨论

6.4 本章小结

总结与展望

一、全文结论

二、展望

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文目录