中国汉族人PKD2基因突变和多态性检测

摘要

目的:建立检测中国汉族人2型多囊肾病基因PKD2突变和多态性的方法;检测收集到的常染色体显性遗传性多囊肾病(ADPKD)家系和健康志愿者PKD2突变和基因多态性;研究基因型与临床表型的关系.方法:收集该院门诊和住院病人中确诊为ADPKD病人家系94个,包括病人114例,健康志愿者50名,提取外周血白细胞DNA;设计PKD2的15个外显子引物,利用多聚酶链反应(PCR)方法进行扩增;利用单链构象多态性分析(SSCP)方法进行基因突变和多态性分析;对SSCP结果中的异常条带标本进行核苷酸序列测定,确定突变位点和类型;利用统计学法对ADPKD病人的临床资料进行分析,探讨ADPKD基因型与临床表现型的关系.结论:建立了用PCR-SSCP直接检测中国汉族人PKD2突变和基因多态性的方法;检测到6种突变和2种基因多态性,丰富了PKD2突变基因谱;为今后开展ADPKD病人产前和囊肿前基因诊断、诊断试剂盒的研发及研究ADPKD的发病机制及探讨基因型和表现型关系提供了实验基础.

目录

缩略词表

前言

材料和方法

1.1主要仪器设备

1.2主要试剂

1.3、常用试剂的配制

1.3研究对象

1.4DNA的制备

1.5PCR扩增PKD2外显子

1.6琼脂糖凝胶电泳

1.7突变分析(SSCP分析)

1.8测序

1.9基因型与临床表型关系分析

结果

2.1PCR结果

2.2 SSCP结果

2.3 测序结果

2.4基因多态性测序结果

2.5基因型与临床表型关系研究结果

讨论

结论

参考文献

PKD2基因突变研究进展

摘要

一、概述

二、PKD2突变的检测方法

三、PKD2的生殖细胞突变（germline mutation)

四、PKD2的体细胞突变

五、PKD2基因多态性

六、基因型与表型的关系

七、结语

参考文献

在读期间发表文章

附录：PKD2 cDNA序列

致谢