肌萎缩侧索硬化症患者骨骼肌蛋白质组学初步研究和利鲁唑治疗肌萎缩侧索硬化症疗效的长程观察

摘要

肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是发生于中枢神经系统的缓慢进展、进行性加重、致死性运动神经元变性疾病.由于上、下运动神经元变性坏死,患者出现肌无力和肌萎缩多在发病后3-5年死于呼吸衰竭和肺部感染.ALS的病因尚不清楚,目前对ALS病因和发病机制有多种学说,但都不能圆满解释该病的发病机制.近年来开展的蛋白质组学研究可以在大通量、平行条件下分离和鉴定组织细胞所表达的所有蛋白质,该课题采用蛋白质组学研究的关键技术双向电泳技术,对ALS患者萎缩肌细胞的总蛋白、周围神经离断伤患者受累肌肉总蛋白与正常人肌细胞的总蛋白进行双向凝胶电泳分离.对所得2-DE凝胶进行计算机软件分析,根据2-DE凝胶上所显示的已被分散发布的蛋白点的表观分子量和表观等电点以及某一个蛋白点的含量进行对比分析,寻找三者间存在的蛋白质合成种类和数量的差异,发现了ALS患者肌细胞蛋白质合成整体上的变化.通过ALS患者和周围神经离断伤患者受累肌肉蛋白质的差异合成初步确认了中枢失神经支配和周围失神经支配导致的骨骼肌萎缩存在的不同蛋白分子机制.通过建立骨骼肌细胞2-DE样品制备和实验体系.在实验中改进了骨骼肌蛋白样品的制备方法,保证了用于进行2-DE电泳的肌细胞蛋白样品的组织单一性,解决了蛋白质组学研究的基本前提即实验对象——组织蛋白单一性的问题.ALS诊断主要依靠临床表现和肌电图变化,而在临床上一旦能够确立诊断患者的病程往往已不可逆转,因此临床实践迫切地需要能够建立ALS的早期诊断方法.该病的治疗方法除利鲁唑(一种谷氨酸受体拮抗剂)能够延长患者的存活期外其他的各种治疗方法均无确切疗效.ALS患者、周围失神经支配患者受累骨骼肌差异表达谱的建立可以帮助我们发现疾病相关或标记分子和药物靶向作用分子,以及不同类型肌萎缩相关蛋白的辨认,在临床上可以根据ALS患者、周围失神经支配患者受累骨骼肌的蛋白质差异合成谱设计这些疾病的蛋白质芯片,有助于该病的早期诊断.还可以提供通过

目录

英文缩略词表

第一部分ALS患者受累骨骼肌、失神经支配骨骼肌、正常人骨骼肌蛋白质组学初步研究

摘要

研究背景

材料与方法

一、试剂与仪器

二.研究对象

三.方法

结果

讨论

参考文献

第二部分利鲁唑治疗肌萎缩侧索硬化症患者疗效的长期观察

摘要

方法

结果

讨论

参考文献

全文小结

综述一肌萎缩侧索硬化症骨骼肌非电生理变化

1.ALS骨骼肌整体功能变化

2.ALS细胞超微结构改变

3.ALS骨骼肌中异常合成的蛋白质

4.骨骼肌中表达异常的基因

参考文献

综述二神经系统蛋白质组学研究进展

1.蛋白质组学概述

2.蛋白质组学在中枢神经系统的运用

3.骨骼肌的蛋白质组学研究进展

参考文献

就读期间发表的文稿、获得的科研基金和奖励

致谢