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一种与半乳糖诱导白内障相关蛋白的分离纯化及鉴定

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前 言

第一部分半乳糖诱导的白内障动物模型的构建

1动物准备

2试剂及仪器

3模型制备

4结果

5讨论

第二部分X36-晶体蛋白的分离纯化与鉴定

1材料和方法

2 结果

3讨论

第三部分βB2晶体蛋白克隆、表达及与X36的关系

1 X36-与βB2-晶体蛋白的关系

2大鼠βB2-晶体蛋白的克隆、表达与纯化

2.1材料与方法

2.2结果

2.3讨论

全文小结

1主要研究结果

2主要创新点

3存在不足

4进一步研究方向

参考文献

论文发表情况

致谢

综述

综述一 晶体蛋白与白内障学研究进展

综述二 糖尿病性白内障的研究及药物治疗

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摘要

本课题在前期研究发现了x36-晶体蛋白的基础上,用半乳糖诱导的方法造大鼠白内障模型,用双向电泳的方法分离水溶性晶体蛋白,用肽质量指纹谱和串联质谱的方法鉴定蛋白质。初步鉴定结果为,x36属于βB1-晶体蛋白。并且用原核表达的方法得到了大量纯化的βB2-晶体蛋白,成功构建βB2-晶体蛋白cDNA原核表达载体pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,并用GST纯化系统纯化、酶切融合蛋白,得到大量高纯度的βB2-晶体蛋白,并经Western-blot证实获得了目标蛋白。为进一步研究其生物学特性及潜在的生理功能打下基础。

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