纤维蛋白原降解产物对巨噬泡沫细胞形成和功能的作用

摘要

动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是心脑血管疾病的主要病理基础，其发病机制尚不明确，目前炎症损伤反应学说得到人们的公认，认为AS的发病过程是一种慢性的炎症反应。巨噬源性泡沫细胞在AS病理过程中起重要作用，巨噬泡沫细胞的形成及其作用是AS斑块损伤形成、发展和崩解的关键。 近年来，AS流行病学调查研究表明血浆高水平纤维蛋白原降解产物(fibrinfibrinogendegradationproducts，FFDP)是一重要、独立的心脑血管疾病危险相关因素。通常FFDP以及其组分D-dimer被认为是凝血活性指标，因为它们常常是高血凝过程前后的关键性因素。目前，越来越多的证据表明FFDP和D-dimer不仅与凝血过程有关，而且与AS炎症反应相关。 本课题旨在研究FFDP对AS过程中巨噬源性泡沫细胞形成和功能的影响。研究结果主要概括为以下四个方面： 1.采用人类单核细胞系U937细胞与ox-LDL共孵育，培养为U937泡沫细胞。收集的U937泡沫细胞采用油红O染色后，光镜下观察，胞浆内出现的明显红染脂质颗粒，符合泡沫细胞形态特征。采用流式细胞仪检测清道夫受体的表达，结果显示FFDP刺激可使清道夫受体表达量显著升高。同时，FFDP刺激后能显著促进单核巨噬细胞吞噬氧化低密度脂蛋白形成泡沫细胞。 2.体外原代培养兔主动脉内皮细胞，测定U937细胞与内皮间粘附率。对照组U937细胞与内皮细胞粘附率为8.04％。结果表明，经FFDP处理后，U937细胞与血管内皮细胞粘附有显著的增加。FFDP50μg/L组的粘附率为26.9％；100μg/L组的粘附率为34.2％；150μg/L组的粘附率为36.3％；300μg/L组的粘附率为44.8％。 3.采用美国SuperArray公司动脉粥样硬化疾病基因芯片OligoAtherosclerosisMicroarray(OHS-038)研究纤维蛋白原降解产物中D-dimer组分对巨噬细胞动脉粥样硬化相关128个基因表达的调控作用。D-dimer刺激后，27个基因在芯片中显著上调，其上调量与对照的U937细胞相比超过2倍。我们将显著改变的基因按照其功能分为粘附分子、胞外间质分子、脂质转运代谢基因、细胞生长分化基因、核转录调节因子和氧化应激相关蛋白6类。 4.采用SYBRreal-timePCR方法，进一步将VCAM1，MMP-9，OLR1，VEGFa和PPARa进行了mRNA表达水平的确认，结果与芯片结果一致，证明D-dimer能显著调控VCAM1，MMP-9，OLR1，VEGFa和PPARa的mRNA表达水平。 综上所述，本课题研究表明FFDP以及其活性组分D-dimer能够显著上调AS巨噬源性泡沫细胞中炎症功能基因的表达，促进泡沫细胞形成，参与AS的病理过程的发生发展。

目录

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缩写词

摘要

前 言

第一部分纤维蛋白原降解产物对巨噬泡沫细胞形成的影响

第二部分FFDP中D-dimer对巨噬细胞中基因表达的影响

全文总结

致 谢

综述：血液凝集与动脉硬化相关性研究进展