PLGA/Ⅰ型胶原/壳聚糖复合人工硬脊膜的研制及其相关研究

摘要

目的：应用生物相容性良好材料聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA)、I型胶原和壳聚糖,研制出新型的复合生物硬脊膜作为理想的硬脊膜修复材料。 方法：应用分子量为5万的PLGA共聚物使用溶剂浇铸/粒子浸出法制作出多孔PLGA支架(P膜),然后在多孔PLGA支架的表面层复合9:1和55比例的I型胶原和壳聚糖材料,分别制作出PGC(5:5)膜和PGC(9:1)膜,然后在PGC(9:1)膜按100u/cm2加入bFGF制成bPGC(9:1)膜。进行材料的吸水率、接触角、孔隙率、力学性能、扫描电镜、细胞毒性实验及细胞增殖实验检测。并从中选择出力学性能满意和生物相容性佳的材料的PGC(9:1)和bPGC(9:1)膜备用。设计出硬脊膜损伤修复动物模璎,并用PGC(9:1)膜、bPGC(9:1)膜及自体筋膜修复硬脊膜。术后1、2、4和16周随机处死取材,肉眼、光镜HE染色检测、透射电镜检测及I型胶原、bFGF和IL-6的免疫组织化学检测,观察疤痕组织修复、材料与脊髓组织粘连、炎性细胞浸润及I型胶原、bFGF和IL-6表达情况。 结果：PGC膜及bPGC膜力学性能及生物相容性优于PLGA膜。在动物实验中应用非缝合技术,PGC(9:1)和bPGC膜(9:1)成功地修复了硬脊膜缺损。两种合成修复膜较自体筋膜的炎性反应较明显,但与脊髓组织粘连较后者轻,P<0.05。与其它两种材料相比,PGC膜抑制了I型胶原蛋白的表达,而bPGC(9:1)与自体筋膜组差异无统计学意义。bPGC(9:1)材料中的bFGF在1-2周内均有表达,4周时未见表达。 结论：通过I型胶原、壳聚糖改性的多孔PLGA材料,可以改变材料的力学性能及生物相容性,其中PGC(9:1)和bPGC(9:1)材料的性能较佳。PGC材料植入机体后,组织的炎性反应较自体筋膜明显,但亦可以达到满意的修复硬脊膜的效果。PGC材料中加入适量的bFGF,可以促进成纤维细胞的增殖与分化,促进硬脊膜组织的修复替代。

目录

论文说明：英文缩略语表

声明

摘要

前言

第一部分人工硬脊膜PLGA系列膜的研制

材料与仪器

方 法

一、Ⅰ型胶原、壳聚糖及bFGF溶液的配制

二、多孔PLGA膜(P膜)的制作

三、PLGA/Ⅰ型胶原复合膜的制作(PG膜)

四、PLGA/Ⅰ型胶原/壳聚糖膜(9：1)的制作(PGC9：1膜)

五、PLGA/Ⅰ型胶原/壳聚糖膜(5：5)的制作(PGC5：5膜)

六、bFGF/PLGA/Ⅰ型胶原/壳聚糖膜的制作(bPGC9：1膜)

结果

一、系列膜肉眼观察

二、实验材料图片

讨 论

结论

参考文献

第二部分PLGMI型胶原/壳聚糖复合膜的物理性能及生物相容性的检测

材料与仪器

方法

一、材料吸水率的测定

二、材料的力学性能的测试

三、接触角测定

四、孔隙率检测

五、细胞毒性实验

六、扫描电镜

结 果

一、材料的吸水率

二、力学性能测定

三、接触角测定

四、孔隙率检测

五、细胞毒性试验结果

六、扫描电镜

讨 论

结 论

参考文献

第三部分硬脊膜损伤修复动物模型的构建

材 料

方 法

一、实验分组

二、硬脊膜损伤修复模型手术操作步骤

结果

1、手术并发症统计

2、不同膜修复时间及一次成功率的比较

讨论

结论

参考文献

第四部分系列膜的病理学及透射电镜研究

材料与仪器

方 法

一、标本的采集及肉眼观察指标

二、光镜检查

结 果

一、肉眼观察

二、光镜下HE染色结果

三、免疫组织化学检查结果

四、透射电镜观察

讨论

结论

参考文献

综述:医用生物可降解材料支架的进展

致 谢

查新结论