结合有TGF—β1的肝素化胶原/壳聚糖支架复合脂肪干细胞修复兔关节软骨缺损的研究

摘要

目的:研究结合有TGF-β1的肝素化胶原/壳聚糖支架与脂肪干细胞进行兔软骨缺损的修复的效果。 方法:1．取兔的脂肪间充质干细胞，行体外扩增培养纯化，并研究其增值生长特性。2．制备结合有TGF-β1的肝素化胶原/壳聚糖支架上，并研究支架的体外降解状况，肝素化对TGF-β1结合率的影响。3．将脂肪干细胞种植于结合有TGF-β1的肝素化胶原/壳聚糖支架上，培养2天后植入兔膝关节全层软骨缺损处观察修复效果。试验分三组：结合有TGF-β1的肝素化胶原/壳聚糖支架与脂肪干细胞复合物为实验组，结合有TGF-β1的肝素化胶原/壳聚糖支架为支架组，并设空白对照组。12周取材，从大体、组织切片HE染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色等方面来评估软骨缺损修复状况。并对结果进行统计学分析。 结果:1．在体外培养条件下兔脂肪干细胞增生分裂活跃，约6-8天即可传代，可通过体外培养获得数目扩增。2．肝素化胶原/壳聚糖支架与未肝素化支架相比不影响其体外降解性，但可明显提高对。TGF-β1的结合率3．实验组大体观察缺损区被软骨样组织充填，组织学检查提示形成透明样软骨结构。而单纯支架组支架大多崩解塌陷，组织学检查提示未形成透明样软骨结构，空白对照组缺损未见明显修复。 结论:肝素化胶原/壳聚糖支架较未肝素化胶原/壳聚糖支架能明显提高与TGF-β1结合力。结合有TGF-β1的肝素化胶原/壳聚糖支架复合脂肪干细胞能较好修复软骨缺损。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

概述

第一章兔脂肪干细胞分离、培养及生物学特性研究

一、前言

二、材料和方法

三、结果

四、讨论

参考文献

第二章肝素化胶原/壳聚糖支架材料的制备及其对TGF-β1结合率的影响

一、前言

二、材料与方法

三、结果

四、讨论

参考文献

第三章组织工程化软骨的构建

一、前言

二、材料和方法

三、结果

四、讨论

参考文献

软骨组织工程研究进展

软骨组织工程常用支架制备技术

附录 在读期间论文发表情况

致谢