声明
摘要
缩略词
前言
第一部分 阳离子聚合物载体的合成及表征
一、仪器与材料
(一)仪器
(二)材料与试剂
二、实验方法
(一)聚合物的合成方法
(二)聚合物的表征
二、实验结果
四、小结
第二部分 聚离子基因复合物的制备及表征
一、仪器与材料
(一)仪器
(二)材料与试剂
二、实验方法
(一)复合物的制备
(二)考察粒子的粒径及zeta电位
(三)透射电镜观察粒子形态
(四)考察不同复合物的凝胶阻滞情况
(五)Hoechst33258法定量测定pDNA的包封率
三、实验结果与讨论
(一)polyplex的粒径
(二)polyplex的电位
(三)透射电镜观察外观形态
(四)琼脂糖凝胶阻滞考察基因包载
(五)Hochest33258法测定pDNA包封率
四、小结
第三部分 聚离子基因复合物的细胞及组织毒性考察
一、仪器与材料
(一)仪器
(二)试剂与材料
(三)细胞株
(四)实验动物
二、实验方法
(一)细胞培养方法
(二)PEG-PAsp(TEP)-thole的体内外毒性评价
四、实验结果与讨论
(一)阳离子聚合物的细胞毒性考察
(二)CD68免疫组化染色
四、小结
第四部分 聚离子基因复合物的促内涵体逃逸及脑转运特性考察
一、仪器与材料
(一)仪器
(二)试剂与材料
(三)细胞株及动物
二、实验方法
(一)定性考察bEnd．3细胞摄取
(二)定量考察bEnd．3细胞的摄取
(三)细胞单层膜透过
(四)定性考察Neuro-2a细胞转染
(五)定量考察Neuro-2a细胞转染
(六)细胞内示踪实验
(七)聚阳离子载药系统的体内分布
三、实验结果与讨论
(一)定性考察bEnd．3细胞的摄取情况
(二)定量考察bEnd．3细胞的摄取情况
(三)考察细胞单层膜透过情况
(四)定性考察Neuro-2a细胞的转染情况
(五)定量考察Neuro-2a细胞的转染情况
(六)细胞内示踪实验
(七)聚阳离子载药系统的体内分布
四、小结
第五部分 聚离子基因复合物沉默BACE1基因
一、仪器和材料
(一)仪器
(二)试剂与材料
(三)实验动物
二、实验方法
(一)western blot检测蛋白含量
(二)Morris水迷宫行为学评价
三、实验结果
(一)western blot检测结果
(二)Morris水迷宫评价polyplex-Tet1／RVG29的AD治疗作用
四、小结
全文总结
参考文献
综述 阳离子聚合物介导脑部基因传递存在的问题和解决策略
发表论文及参加科研工作情况
致谢
