灌注--负压技术(NPWTi)治疗感染性创面的实验研究

摘要

研究背景:感染性创面的修复是外科临床治疗中的棘手问题之一，也是医学研究的一个重要课题。创面灌注-负压技术(Negative Pressure Wound Therapy withInstillation，NPWTi)是一种将液体灌注与负压吸引相结合的物理创面治疗技术，较单纯的创面负压技术(Negative Pressure Wound Therapy，NPWT)能更好的减轻创面炎症反应、促进肉芽组织生长及创面愈合。创面灌注-负压装置具有实时、自动与可控的优点，已经初步应用于伴随大量渗液和组织坏死的创面、慢性难愈性创面等感染性创面。相比较于创面负压技术，灌注-负压技术是否针对感染性创面的修复更加有效，是否有更加合适的灌注液体结合致病菌的种类而针对性治疗，是我们课题研究的初衷。该治疗中灌注液体的选择使用了多种创面治疗溶液，包括等渗溶液、抗生素、麻醉剂抗菌剂等。通过回顾文献，灌注-负压技术临床应用中存在两个问题，一是针对常见的感染性创面治疗，尚未有全面的实验研究理论依据;二是灌注液体的选择基本停留在经验治疗的初级阶段，尚未提出明确的实验研究根据。针对以上两问题，本研究通过建立实验动物皮肤软组织感染模型，探讨不同的灌注液体在灌注-负压技术治疗感染创面时的疗效差异。
　　目的:1.构建研究感染性皮肤创面动物模型;2.研究灌注-负压技术对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌感染模型是否有作用差异性;3.探讨不同灌注液体在灌注-负压技术控制创面感染的作用以及对创面愈合的促进作用;4.寻求感染创面最合适的灌注液体，为灌注-负压技术治疗感染性创面的临床规范提出实验研究依据。
　　方法:使用“全层皮肤切除-细菌接种”的方法构建实验动物软组织缺损模型，随机分为金黄色葡萄球菌组(n=10)和绿脓杆菌组(n=10)，每只动物接种一种细菌，每只动物制作8个创面，左右对称两处为一组，分别为实验组与对照组，设定灌注-负压治疗的为实验组，常规换药治疗为对照组，同时选择三种抗菌剂和生理盐水作为灌注-负压治疗实验组的灌注液体，即分为聚六亚甲基双胍盐酸盐-NPWTi组、氧化氯化合物-NPWTi组、硝酸银-NPWTi组、生理盐水-NPWTi组;观察并测定各组的创面面积与体积、病理形态学变化、髓过氧化物酶(MPO)活性、炎性因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）表达及观察创面肉芽组织毛细血管密度、血管形成相关因子(VEGF、ICAM)表达变化。
　　结果:使用抗菌剂作为灌注液进行灌注-负压治疗，以聚六亚甲基双胍盐酸盐溶液作为灌注液对绿脓杆菌感染创面修复效果最佳;氧化氯化合物溶液作为灌注液对金黄色葡萄球菌感染创面修复效果最佳。三种抗菌剂（聚六亚甲基双胍盐酸盐溶液、氧化氯化合物溶液、硝酸银溶液）作为灌注液，在收缩感染创面面积、填充创腔体积、降低MPO活性、下调炎性因子表达、促进血管生成等方面效果均优于生理盐水灌注组。而应用灌注-负压技术对以上指标的改善均优于常规换药技术。
　　结论:灌注-负压技术通过下调炎症因子的含量及表达降低了创面的炎症反应，同时上调血管形成相关因子表达促进组织血管化，达到肉芽组织新生的目的。从而观察到应用该技术治疗感染创面可有效促进伤口收缩及伤腔填充。灌注-负压应用于治疗感染性创面具有独特的优势，针对不同致病菌选择合适的抗菌剂灌注液可有效促进感染性创面的伤口收缩、降低炎性反应及加速创面愈合。灌注-负压技术可作为感染性创面修复的治疗手段之一。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一部分 灌注-负压技术促进感染性创面缩小的作用

一、材料与方法

二、实验结果

三、讨论

第二部分 灌注-负压技术对感染性创面组织修复与胶原生成的作用

一、材料与方法

二、实验结果

三、讨论

第三部分：灌注-负压技术影响感染创面炎症水平的研究

实验一 髓过氧化物酶(MPO)的活性检测

一、材料与方法

二、实验结果

三、讨论

实验二 炎症因子含量的检测

一、材料与方法

二、实验结果

三、讨论

实验三 炎症因子mRNA表达的检测

一、材料与方法

二、实验结果

三、讨论

第四部分：灌注-负压技术影响感染创面血管形成的研究

实验一 血管形成相关因子表达的检测

一、材料与试剂

二、实验结果

三、讨论

实验二 毛细血管密度的检测

一、材料与试剂

二、实验结果

三、讨论

全文结论小结

参考文献

综述 灌注-负压技术(NPWTi)治疗感染性创面的研究进展

在读期间发表论文

致谢