粘虫细胞培养及对六种天然生物源活性物质毒力研究

摘要

本文主要就粘虫细胞培养及对六种天然生物源活性物质毒力进行了研究，主要内容如下： 1.细胞培养 以东方粘虫不同虫态为材料进行了胚胎细胞、血淋巴细胞、脂肪体细胞、中肠细胞和肌肉细胞的原代培养，结果如下： 胚胎细胞：出现两种类型的细胞，一株经10个月原代培养，开始传代，细胞呈现卵圆形，贴壁生长，目前已经传至3代；而另一株培养4个月，出现单个胚胎细胞变长，呈梭形，5个月分裂成扇形向周围扩散，7个月，细胞束周围有小而圆亮的单个细胞。 肌肉细胞：肌纤维松散，有大量的肌卫星细胞分离，成肌细胞横纹相间排列，细胞膜完整；贴壁后很多肌卫星细胞由圆形变为梭形，胞体饱满，两端尖细，呈杆状，观察到肌卫星细胞的分裂。 脂肪体细胞：5d后出现气泡状并向四周蔓延，1个月后气泡逐渐消失并出现排列紧密的卵状细胞，50d细胞向四周发散，3个月后细胞铺满瓶底，开始传代，传代后生长缓慢，呈团状集聚。 中肠细胞：中肠细胞发出现两种不同类型的细胞，其中柱型细胞于3个月后出现，4个月呈扇形分裂；梭型细胞于2个月后出现，随后开始分裂成簇。5个月后有单细胞从细胞簇团上游离并继续贴壁繁殖。 血淋巴细胞：2个月细胞密度明显减小，少数细胞变亮，5个月个别细胞开始变粗变长；6个月细胞明显分裂显现，出现单个细胞克隆团。 2.细胞毒力测定 苦皮藤素Ⅳ、苦皮藤素Ⅴ处理胚胎细胞24h后，观察发现细胞裂解，出现大量细胞碎片，培养基变浑浊，其对粘虫胚胎细胞的致死中浓度分别为76.42和129.3μg/mL；苦皮藤素Ⅳ、Ⅴ处理后的粘虫中肠细胞在24h内逐渐减少而培养基依然保持澄清，相反杠柳提取物415[＃]和3[＃]可以使细胞逐渐分解而培养基同时变浑浊。 六种天然生物源杀虫活性物质苦皮藤素Ⅳ、Ⅴ、WML-1、WML-2、415[＃]、3[＃]对粘虫中肠细胞的致死中浓度分别为34.93、7.716、215.7、21.51、10.22和10.56μg/mL；对粘虫血细胞的致死中浓度都在100μg/mL以下，其致死中浓度分别为37.51、5.386、36.70、46.99、9.534和4.049μg/mL；对粘虫脂肪体细胞的致死中浓度分别为34.09、11.23、170.0、23.74、14.20和15.07μg/mL。

目录

文摘

英文文摘

研究生学位论文的独创性声明、导师指导研究生学位论文的承诺及关于其他单位与人员对研究生学位论文使用授权的说明

第一章文献综述

第二章材料与方法

第三章结果与分析

第四章讨论

第五章小结

参考文献

致谢

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