葡萄籽超微粉中白藜芦醇检测方法的研究

摘要

本文从葡萄籽超微粉中白藜芦醇的提取，纯化和检测三个方面作出研究，为葡萄籽超微粉中白藜芦醇的检测标准的建立提供依据。 超声波提取工艺如下：称取1.000g葡萄籽超微粉，加入50mL甲醇，在超声波频率为40kHz，提取温度为60℃，提取时间为10min，提取4次的条件下进行超声波提取，合并提取液，冷冻离心，取上层清液，旋转蒸发置干。有机溶剂萃取工艺如下：提取后所得到的干物质用100mL乙酸乙酯：水=1：1溶液溶解，收集乙酸乙酯层，减压浓缩置干，甲醇定容于10mL容量瓶中。 通过对HPLC和紫外分光光度法方法学考察，HPLC仪器精密度良好，精密度试验的RSD为1.173％；重复性试验的RSD为2.043％：回收率在93.70％～98.68％之间，平均回收率为97.13％，RSD为2.113％，最后测得白藜芦醇平均含量8.482μg/g，线性范围为0.2～10.0～g/mL。而紫外分光光度精密度试验得到白藜芦醇的RSD为2.221％；重复性试验得到白藜芦醇样品的RSD为2.644％；回收率在87.90％～97.60％之间，平均回收率为93.37％，RSD为4.725％，最后测得白藜芦醇平均含量8.009μg/g，线性范围为0.2～1.0μg/mL。 通过对HPLC和紫外分光光度法测定的白藜芦醇含量结果进行显著性分析，差异极显著；HPLC和紫外分光光度法方法学考察与比较结果：HPLC方法的精密度、重复性和回收率均比紫外分光光度法的相对标准偏差要小，因此HPLC方法更适应于葡萄籽产品中的白藜芦醇的检测。 HPLC检测条件：色谱柱为shim-park VP-ODS C<,18>柱，流动相为乙腈：水：乙酸=28：70：2溶液进行等压洗脱，流速1.0mL/min，检测波长为305nm，柱温为30℃，进样量20μl。

目录

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声明

第一章文献综述

1.1葡萄籽的成分

1.1.1脂肪酸成分

1.1.2黄酮和多酚类

1.1.3氨基酸和蛋白质

1.1.4其它成分

1.2白藜芦醇的研究进展

1.2.1白藜芦醇的理化性质

1.2.2白藜芦醇的药理作用

1.2.3白藜芦醇的制备

1.2.4白藜芦醇的提取

1.2.5白藜芦醇的纯化

1.2.6白藜芦醇的检测

1.3本文研究的目的和意义

前言

第二章材料与方法

2.1试验材料、试剂与仪器

2.1.1试验材料

2.1.2试验试剂

2.1.3主要仪器

2.2试验方法

2.2.1白藜芦醇的HPLC检测

2.2.2白藜芦醇的提取

2.2.3白藜芦醇的纯化

2.2.4 HPLC方法学考察

2.2.5紫外分光光度方法学考察

2.2.6统计分析

第三章结果与分析

3.1白藜芦醇的HPLC检测

3.1.1色谱条件的确定

3.2白藜芦醇的提取

3.2.1超声波提取

3.2.2加热回流提取

3.3白藜芦醇的纯化

3.3.1柱层析

3.3.2双水相萃取

3.3.3有机溶剂萃取

3.4 HPLC方法学考察

3.4.1标准曲线的建立

3.4.2精密度试验

3.4.3重复性试验

3.4.5回收率试验

3.5紫外分光光度方法学考察

3.5.1标准曲线的建立

3.5.2精密度试验

3.5.3重复性试验

3.5.4回收率试验

3.6统计分析

第四章讨论

4.1提取方法比较

4.2纯化方法比较

4.3检测方法比较

4.4 HPLC检测条件的确定

第五章结论

参考文献

致谢

作者简介

附录