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西宁地区仔猪致病性大肠杆菌血清型、黏附素及耐药性研究

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文献综述

第一章仔猪致病性大肠杆菌研究进展

1.1仔猪大肠杆菌病研究概况

1.2大肠杆菌的耐药性及耐药性监测方法概述

1.3仔猪大肠杆菌病的防治

试验研究

第二章仔猪致病性大肠杆菌分离及血清型鉴定

2.1材料

2.2方法

2.3结果

2.4讨论

2.5小结

第三章 粘附素性菌毛检测及油乳剂苗的研究

3.1材料

3.2方法

3.3结果

3.4讨论

3.5小结

第四章 大肠杆菌耐药性检测

4.1材料

4.2方法

4.3结果

4.4讨论

4.5小结

结论

参考文献

致谢

作者简介

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摘要

对西宁地区规模化养猪场仔猪致病性大肠杆菌进行了分离及致病性、血清型鉴定,确立了流行优势血清型;对主要流行菌株进行了黏附素性菌毛的检测及菌毛抗原免疫试验;用14种抗生素对170株流行菌株用NCCLS方法进行了耐药性检测。 从西宁地区8个规模化养猪场的247份腹泻仔猪直肠棉拭子样本及39份疑似仔猪水肿病死亡病料中分离、鉴定出253株致病性大肠杆菌,总检出率88.5%(253/286),其中从腹泻仔猪检出致病性大肠杆菌233株,检出率94.3%(233/247),从病死猪病料中检出20株,检出率为51.3(20/39),说明致病性大肠杆菌是引起仔猪腹泻的主要病原,但不同猪场检出率差异明显。血清型鉴定,该地区存在的血清型有O<,8>、O<,54>、O<,139>、O<,141>、O<,138>、O<,147>、O<,9>、O<,11>l、O<,20>、O<,101>、O<,45>等12种,其中08、 O<,138>、 O<,141>、 O<,138>、 O<,111>菌株共191株,占244株鉴定出血清型菌株的78.3%,为该地区流行优势血清型。 用甘露糖敏感性血凝试验(MSHA)及抗甘露糖血凝试验(MRHA)检测了10株O<,138>及10株O<,141>菌株菌毛类型。MSHA结果表明,20株细菌均可凝集兔、豚鼠、人、鸡、绵羊红细胞,说明其均可表达F1菌毛(Ⅰ型菌毛);MRHA结果表明,8株O<,138>和7株O<,141>菌株均可凝集豚鼠、鸡红细胞,说明产生的菌毛为F4(K<,88>)。用加热法提取的菌毛制备油包水型油乳佐剂苗,以98%菌毛抗原、2%土温-80作为水相,94%白油、6%司班作为油相,按1:1一次乳化完成,配比最佳,疫苗的各理化指标符合生物制品学要求;免疫家兔后其抗体滴度为1:64;用牛心琼脂培养,菌毛对豚鼠红细胞的凝集价达1:640,说明牛心琼脂培养基能更好地表达F4菌毛。 采用NCCLS颁布的标准方法,对170株地方优势流行菌株进行了14种抗生素敏感试验,结果表明,所有菌株均存在不同程度的耐药现象,对青霉素、氨苄青霉素、链霉素、四环素的耐药率分别高达87.1%、80.6%、62.9%、56.5%。耐2~12种抗生素的菌株数分别是8、20、39、38、25、17、8、6、5、2、2株,其中4重、5重、6重耐药的菌株共102株,占总菌株的60.0%。试验表明,该地区优势流行菌株对多黏菌素B、诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星等比较敏感。

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