苹果炭疽叶枯病病原学及苹果炭疽病侵染来源研究

摘要

苹果炭疽病是苹果的一类主要病害，包括引起果实腐烂病的苦腐病及引起叶片坏死的炭疽叶枯病。苹果炭疽病造成采前落叶、落果、腐烂，贮藏期烂果等，给果农带来巨大的经济损失。苹果炭疽叶枯病为近年来我国爆发的一种新病害，对其病原还没有进行系统研究。苹果苦腐病和苹果炭疽叶枯病均由多种炭疽菌引起。这些病原菌除了危害苹果外，还可以侵染多种不同的寄主，其中许多寄主在果园中及果园周边广泛存。它们在苹果炭疽病发病中的作用目前还不明确。本研究对来自陕西、河南、山东等地不同寄主的刺盘孢属病原菌进行了系统分类鉴定及致病性测定，以期明确炭疽叶枯病病原及苹果园周边不同寄主来源炭疽菌在苹果炭疽病发病中的作用，取得了以下主要研究结果。
　　1.明确了我国苹果炭疽叶枯病的病原。从陕西、河南及山东苹果炭疽叶枯病的标样进行了广泛采集，共采集叶片及果实样品199份，分离得到76株纯菌株，结合形态学特征及多基因（ITS、ACT、GAPDH、CHS–1和TUB2）联合及ApMat基因系统发育分析，并将这些菌株鉴定为果生刺盘孢Colletotrichum fructicola、隐秘刺盘孢C. aenigma和嘎拉刺盘孢C. galae。通过致病性实验鉴定这三个种为苹果炭疽叶枯病病原菌，其中果生刺盘孢C. fructicola占总菌数的76.6％，分布在陕西、河南、山东等地，为优势种；嘎拉刺盘孢C. galae G.Y. Sun&Wei Wang为新种。在国内外首次发现C. fructicola和C. aenigma为苹果炭疽叶枯病病原。
　　测定了C. fructicola和C. galae对不同品种苹果果实和叶片的致病性，两种刺盘孢的菌株对嘎拉、秦冠、金冠、粉红女士、太平洋玫瑰、金世纪、蜜脆等金冠系品种的叶片均致病，有伤接种苹果时，对嘎拉、金冠、秦冠、太平洋玫瑰、新红星、富士等品种果实具有致病性，无伤接种时，C. fructicola可以使嘎拉和金冠发病，C. galae可以使嘎拉发病。结果表明不同品种叶片和果实的抗病性存在显著的差异，易感病品种嘎拉、秦冠、金世纪等均为金冠品种的后代。
　　2.明确了来自果园周边其它寄主的炭疽菌可以成为苹果炭疽病的侵染源。本研究对果园周边辣椒、葡萄、猕猴桃等寄主的炭疽病标样进行系统采集，共采集样品329个，分离获得纯菌株251个。综合形态学及多基因（ITS、ACT、GAPDH、CHS–1和TUB2）和ApMat基因系统发育分析，将供试菌株鉴定为16个刺盘孢属种。
　　来自辣椒寄主炭疽病病原菌归属14种，分别是隐秘刺盘孢C. aenigma、马铃薯刺盘孢C. coccodes、松针刺盘孢 C. fioriniae、果生刺盘孢 C. fructicola、胶胞刺盘孢C. gloeosporioides、辽宁刺盘孢C. liaoningense、冬麦刺盘孢C. liriopes、斯科维尔刺盘孢C. scovillei、杜阳刺盘孢C. duyangense、平头刺盘孢C. truncatum、高代花刺盘孢C. godetiae、杨柳刺盘孢C. salicis、杨凌刺盘孢C.yanglingense和定边刺盘孢C. dingbianense。致病性测定显示，有伤接种时所有菌株对苹果果实致病，其中果生刺盘孢C. fructicola、胶胞刺盘孢C. gloeosporioides、冬麦刺盘孢C. liriopes等3个种无伤接种对苹果果实致病。结果表明辣椒来源的刺盘孢均可以作为苹果苦腐病的侵染来源。共发现3个新种，杨凌刺盘孢C.yanglingense G.Y. Sun&Wei Wang、杜阳刺盘孢C. duyangense G.Y. Sun&Wei Wang和定边刺盘孢C. dingbianense G.Y. Sun&Wei Wang；发现2个国内新纪录种，高代花刺盘孢C. godetiae和杨柳刺盘孢C. salicis；通过致病性实验鉴定得到3个辣椒新病原，冬麦刺盘孢C. liriopes、C. godetiae和C. salicis。
　　来自猕猴桃寄主的炭疽病病原菌归属3个种，分别是朝天椒刺盘孢C. conoides、果生炭疽菌C. fructicola和胶胞刺盘孢C. gloeosporioides；致病性测定显示，有伤接种所有菌株均对苹果果实致病，胶胞刺盘孢C. gloeosporioides无伤接种对苹果果实致病。表明猕猴桃来源的刺盘孢可以作为苹果苦腐病的侵染来源。通过致病性实验鉴定得到2个猕猴桃新病原，朝天椒刺盘孢C. conoides和胶胞刺盘孢C. gloeosporioides。
　　来自葡萄寄主的炭疽病病原菌归属1个种：葡萄刺盘孢C. viniferum；致病性测定显示，有伤接种菌株对苹果果实致病，无伤接种对苹果果实不致病。
　　致病性测定显示这些来自不同寄主的刺盘孢都可以在田间侵染苹果，可以作为为苹果炭疽病的初侵染源。在田间，这些寄主与苹果之间可能会发生交叉侵染，应注意果园内不要套种。
　　3.明确了不同寄主来源的果生刺盘孢致病性分化情况。从苹果（Malus domestica）、辣椒（Capsicum sp.）、猕猴桃（Actinidia chinensis）、梨（Pyrus sp.）等寄主获得多个果生刺盘孢菌株，经过形态学及系统发育分析显示，明确这些菌株均归属果生刺盘孢种的范围。交互接种证明果生刺盘孢存在显著的致病性分化。根据在鉴别寄主嘎拉和梨果实上的致病性差异将果生刺盘孢分为2个专化型：果生刺盘孢苹果专化型C. fructicola f. sp. mali和果生刺盘孢梨专化型C. fructicola f. sp. pyri。根据果生刺盘孢苹果专化型在不同品种苹果上的致病力差异分为两个致病型：苦腐型和炭疽叶枯型。研究结果显示来自辣椒、猕猴桃、梨、木瓜、油桃等寄主的果生炭疽菌均不能引起苹果炭疽叶枯病，表明这些寄主来源的C. fructicola不是引起我国苹果炭疽叶枯病的病原。

目录

声明

第一章 文献综述

1.1苹果炭疽病概况

1.2刺盘孢属分类研究概况

1.3苹果园周边寄主炭疽病的发生情况

1.4本论文的研究内容和意义

第二章 苹果炭疽叶枯病病原学研究

2.1 前言

2.2实验材料

2.3 试验方法

2.4 结果与分析

2.5 结论与讨论

第三章 果园周边寄主刺盘孢对苹果致病性研究

3.1 前言

3.2材料与方法

3.3 结果与分析

3.4 结论与讨论

第四章 不同寄主来源果生刺盘孢致病性分化

4.1 前言

4.2材料与方法

4.3 结果与分析

4.4 结论与讨论

第五章 结论

参考文献

附录

致谢

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