日粮能量蛋白水平对滩羊主要营养素转运载体mRNA表达的影响

摘要

本研究旨在探讨日粮能量和蛋白水平对滩羊小肠十二指肠段和肌肉（背最长肌）组织中主要营养素转运载体mRNA表达的影响，揭示日粮营养水平对滩羊主要营养素转运载体的转运调控机制，为滩羊科学配制阶段性日粮提供理论依据。
　　选取112只健康、体重相近的滩羊（公、母各56只），随机分成4组，每组有4个重复，每个重复7只羊。各组试验滩羊分别饲喂不同能蛋水平饲粮:84％标准水平(Ⅰ组)、96％标准水平(Ⅱ组)、108％标准水平（Ⅲ组）和120％标准水平（Ⅳ组），标准日粮能量和蛋白水平参考肉羊饲养标准(NY/T816-2004)。试验根据滩羊的体重分为:29～35kg和36～40kg两个阶段，于每个阶段末，每个重复屠宰1只试验羊，取其十二指肠和背最长肌组织样，采用实时荧光定量PCR技术检测葡萄糖转运载体SGLT1、GLUT4、GLUT5，小肽转运载体PepT1，氨基酸转运载体CAT1、EAAT3、EAAT5和脂肪酸转运载体FATP1、FATP4基因mRNA的表达量变化。试验主要研究结果如下:
　　1.日粮能量和蛋白质水平对滩羊十二指肠和肌肉中葡萄糖转运载体mRNA表达的影响
　　在29～35kg阶段末，十二指肠中SGLT1mRNA的表达量Ⅲ组最高(P＜0.05)，而在36～40kg阶段末各组间无显著性差异(P＞0.05);肌肉中SGLT1基因mRNA的表达量在两个阶段都随着能量和蛋白水平的提高而增加(P＜0.05)。
　　在29～35kg阶段末，十二指肠中GLUT4基因mRNA的表达量在各组间无显著性差异(P＞0.05)，而在36～40kg阶段末GLUT4基因mRNA的表达量随着能量蛋白水平的提高而增加(P＜0.05);在肌肉中，GLUT4基因mRNA在两个阶段末表达量均为Ⅳ组最高(P＜0.05)。
　　在两个试验阶段，GLUT5基因mRNA的表达量没有呈现规律性变化。
　　2.日粮能量和蛋白质水平对滩羊十二指肠和肌肉中小肽转运载体mRNA表达的影响
　　在29～35kg阶段末，十二指肠中PepT1mRNA的表达量随着能量蛋白水平的提高呈先下降再上升的趋势(P＜0.05)，在36～40kg阶段末，PepT1mRNA的表达量变化趋势恰好与第一阶段相反，随着能量蛋白水平的提高呈先升高再下降的趋势(P＜0.05);肌肉中两个阶段PepT1基因mRNA的表达都无显著性差异（P＞0.05）。
　　3.日粮能量和蛋白质水平对滩羊十二指肠和肌肉中氨基酸转运载体mRNA表达的影响
　　在29～35kg阶段末，十二指肠CAT1mRNA的表达量Ⅳ组显著高于其它三组(P＜0.05)，在36～40kg阶段末，CAT1mRNA的表达量Ⅲ组显著低于Ⅱ组(P＜0.05);肌肉中，29～35kg阶段末Ⅲ组CAT1mRNA的表达量显著低于其它各组（P＜0.05），在36～40kg阶段末，四组之间的表达量没有显著性差异（P＞0.05）。
　　在29～35kg阶段末，十二指肠EAAT3mRNA的表达量Ⅲ组显著高于其它三组(P＜0.05)，36～40kg阶段末，EAAT3mRNA的表达量随着能量蛋白水平的提高呈上升趋势(P＜0.05);肌肉中两个阶段末EAAT3mRNA的表达量都随能量蛋白水平的增加而呈上升趋势，Ⅰ组的表达量最低，其它三组之间无显著性差异(P＞0.05)。
　　在29～35kg阶段末，十二指肠中EAAT5mRNA的表达量呈先上升后下降的趋势，而在36～40kg阶段末，小肠中EAAT5mRNA的表达量呈下降趋势;肌肉中29～35kg阶段末，Ⅱ组的EAAT5mRNA表达量最高(P＜0.05)，36～40kg阶段末，Ⅲ组的表达量显著高于其它各组(P＜0.05)。
　　4.日粮能量和蛋白质水平对滩羊十二指肠和肌肉中脂肪酸转运载体mRNA表达的影响
　　在两个试验阶段，十二指肠中FATP4基因mRNA的表达量均随营养水平的提高逐渐上升;肌肉中FATP1基因mRNA的表达量均呈先下降再升高的趋势。
　　综上，日粮能量蛋白水平可以不同程度的调控滩羊十二指肠和肌肉中主要营养素转运载体基因mRNA的表达，从而使机体对这些营养物质的吸收利用率随之改变，以适应滩羊的生长发育。

目录

论文说明

声明

摘要

第一章 文献综述

1．1 糖类转运载体的研究进展

1．1．1 糖类转运载体的分类及其组织分布

1．1．2 糖类转运载体的跨膜转运机制

1．1．3 影响糖类转运载体表达调控的因素

1．2 小肽转运载体的研究进展

1．2．1 小肽转运载体的组织分布

1．2．2 小肽转运载体转运的机制

1．2．3 影响小肽转运载体表达调控的主要因素

1．3 氨基酸转运载体的研究进展

1．3．1 氨基酸转运载体的分类及其组织分布

1．3．2 氨基酸转运载体的转运机制

1．3．3 影响氨基酸转运载体表达活性的因素

1．4 脂肪酸转运载体的研究进展

1．4．1 脂肪酸转运载体的分类及其组织分布

1．4．2 脂肪酸的转运机制模型

1．4．3 影响脂肪酸转运载体表达的调控因素

1．5 本研究的目的和意义

第二章 日粮能量蛋白水平对葡萄糖转运载体mRNA表达的影响

2．1 材料与方法

2．1．1 试验动物

2．1．2 试验设计

2．1．3 试验日粮与饲养处理

2．1．4 样品采集

2．1．5 组织样品RNA的提取

2．1．9 数据分析

2．2 结果与分析

2．2．1 十二指肠和肌肉组织总RNA的质量检测和融解曲线分析

2．2．2 日粮能量和蛋白质水平对SGLT1基因mRNA表达的影响

2．2．3 日粮能量和蛋白质水平对GLUT4基因mRNA表达的影响

2．2．4 日粮能量和蛋白质水平对GLUT5基因mRNA表达的影响

2．3 讨论

2．3．1 日粮能量和蛋白质水平对滩羊十二指肠和肌肉中SGLT1基因mRNA表达的影响

2．3．2 日粮能量和蛋白质水平对滩羊十二指肠和肌肉中GLUT4基因mRNA表达的影响

2．3．3 日粮能量和蛋白质水平对滩羊十二指肠和肌肉中GLUT5基因mRNA表达的影响

2．4 小结

第三章 日粮能量蛋白水平对小肽和氨基酸转运载体mRNA表达的影响

3．1 材料与方法

3．1．1 试验动物

3．1．2 试验设计

3．1．3 试验日粮和饲养处理

3．1．4 样品采集

3．1．5 总RNA的提取

3．1．6 cDNA第一条链的合成

3．1．7 引物设计

3．1．8 实时荧光定量PCR

3．1．9 数据分析

3．2 结果与分析

3．2．2 日粮能量和蛋白质水平对CAT1基因mRNA表达的影响

3．2．3 日粮能量和蛋白质水平对EAAT3基因mRNA表达的影响

3．2．4 日粮能量和蛋白质水平对EAAT5基因mRNA表达的影响

3．3 讨论

3．3．2 日粮能量和蛋白质水平对十二指肠和肌肉中CAT1基因mRNA表达的影响

3．3．3 日粮能量和蛋白质水平对十二指肠和肌肉中EAAT3基因mRNA表达的影响

3．3．4 日粮能量和蛋白质水平对十二指肠和肌肉中EAAT5基因mRNA表达的影响

3．4 小结

第四章 日粮能量蛋白水平对脂肪酸转运载体mRNA表达的影响

4．1 材料与方法

4．1．1 试验动物

4．1．2 试验设计

4．1．3 试验日粮和饲养处理

4．1．4 样品采集

4．1．5 总RNA的提取

4．1．7 引物设计

4．1．8 实时荧光定量PCR

4．1．9 数据分析

4．2 结果与分析

4．2．1 日粮能量和蛋白质水平对十二指肠FATP4基因mRNA表达的影响

4．2．2 日粮能量和蛋白质水平对肌肉FATP1基因mRNA表达的影响

4．3．2 日粮能量和蛋白质水平对肌肉FATP1基因mRNA表达的影响

4．4 小结

第五章 总结

5．1 结论

5．2 创新点

5．3 下一步研究计划

参考文献

附录

致谢

作者简介