日粮营养水平对前胃上皮几种氨基酸转运载体及Na+/H+交换蛋白mRNA表达的影响

摘要

本研究包括两个部分:1、四种氨基酸转运载体mRNA在前胃上皮中的表达及日粮营养水平对其表达的调节；2、日粮营养水平对山羊瘤胃上皮Na+/H+交换蛋白mRNA表达的影响。
　　 试验一:四种氨基酸转运载体mRNA在前胃上皮中的表达及日粮营养水平对其表达的调节
　　 运用RT-PCR的方法对山羊、奶牛和黄牛前胃上皮中四种氨基酸转运载体ASCT2、CAT1、EAAT3及ATB0+的表达情况进行了检测。结果显示,山羊、奶牛和黄牛的瘤胃和瓣胃上皮中均存在这四种基因的表达。
　　 16只70日龄断奶杂交山羊随机分成低日粮营养水平组(对照组)和高日粮营养水平组(试验组)。两组山羊在试验期间均自由采食花生秆和饮水,试验组山羊在每天的8:00、11:00、13:00和17:00分别饲喂精料75克,饲喂持续六周后宰杀取样。试验期间,试验组山羊的日均蛋白质摄入量及能量摄入量均显著高于对照组(P<0.01).山羊屠宰后检测表明,试验组山羊的日增重、瘤胃干重/胴体重均显著高于对照组(P<0.05),而瓣胃干重/胴体重则显著低于对照组(P<0.05)；运用气相色谱方法检测瘤胃液与瓣胃液的VFA,结果显示高日粮营养条件下山羊瘤胃液与瓣胃液中,总挥发性脂肪酸的含量、乙酸、丙酸及丁酸的含量均显著高与低营养组(P<0.01)；高日粮营养水平组山羊瘤胃液与瓣胃液的pH均显著低于低日粮营养水平组；用相对定量RT-PCR的方法比较ASCT2、CAT1与EAAT3的mRNA在前胃上皮的表达,结果表明试验组ASCT2的mRNA在瘤胃上皮的表达水平显著高于对照组(P<0.01),但ASCT2的mRNA在瓣胃上皮的表达水平显著地低于对照组(P<0.01)； EAAT3在瘤胃与瓣胃上皮的mRNA表达水平在高、低日粮水平条件之间没有差异(P=0.22和p=0.67)；本试验中,CAT1的mRNA在两组山羊前胃上的表达水平在高、低日粮营养水平条件下均很低,无法进行量化分析。
　　 试验二:日粮营养水平对山羊瘤胃上皮Na+/H+交换蛋白mRNA表达的影响
　　 动物饲养方案与试验设计同上。用实时荧光PCR的方法检测山羊瘤胃上皮NHE1、NHE2及NHE3 mRNA的表达,表明试验组NHE1、NHE3 mRNA的水平显著高于对照组(P<0.05),而NHE2 mRNA的表达水平在两组山羊之间没有差异(P=0.93)。