抗凝药物华法林的荧光光谱法测定及其与牛血清白蛋白相互作用研究

摘要

华法林是一种重要的香豆素类抗凝血药物。临床上，用作心脏机械瓣膜置换术患者终身口服抗凝药，以防止血栓形成和循环栓塞的发生，但如果使用不当可导致严重的并发症，甚至危及生命。因此，华法林浓度的监测对于术后抗凝过程的作用十分重要。本文研究建立了抗凝药物华法林的测定新方法，讨论了华法林与β-环糊精的包合作用，进行了其与牛血清白蛋白相互作用研究。全文包括六部分。 第一章综述 综述了现代仪器分析方法在药物分析中的应用，对近年国内外华法林的测定方法研究及应用进行总结，并在此基础上提出了本文的选题依据和研究内容。 第二章水-乙醇混合溶剂中抗凝药物华法林的荧光光谱法测定研究在水-乙醇混合溶剂(v：v=3：7)介质中，研究建立了一种华法林的荧光光谱分析方法。在优化的实验条件下，华法林钠在0.3～7.1μg·mL<'-1>浓度范围内与荧光强度I<,f>有良好的线性关系，检测限0.11μg·mL<'-1>，应用于药物片剂中华法林钠的测定，回收率在96.7～104.9％，结果满意。 第三章β-环糊精增强荧光光谱法测定水介质中抗凝药物华法林含量建立了一种以β-环糊精为荧光增强剂，简便，快捷测定华法林的荧光光谱新方法。华法林钠在水介质中的最大激发和发射波长分别为λ<,ex>305 nm，λ<,ex>388 nm，其线性范围为0.1～10.2μg·mL<'-1>，检测限0.04μg·mL<'-1>。应用该方法测定药物样品中华法林钠含量，回收率在96.7～102.4％。 第四章抗凝药物华法林与β-环糊精的包合作用研究基于β-环糊精与华法林形成包合物，显著地增强华法林的荧光强度，采用荧光光谱法首次进行了华法林与β-环糊精包合作用的研究。结果表明，依据直接荧光法改进的Benesi-Hildebrand方程，求得华法林-β-环糊精包合物的包合比为1：1；包合平衡常数610 L·mol<'-1>。 第五章高效毛细管电泳对华法林的测定方法研究采用国产高效毛细管电泳仪对华法林的测定方法进行了讨论。结果表明，华法林的检测波长210 nm，缓冲溶液15 mmol<'-1>的磷酸盐(pn 9.18)，工作电压9 kV。在此条件下，华法林的线性范围为0.3 ～ 15.4μg·mL<'-1>，检测限0.1μg·mL<'-1>。 第六章抗凝药物华法林与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究利用荧光光谱和紫外吸收光谱，研究了生理pH条件下华法林与牛血清白蛋白的相互作用，探讨了华法林对牛血清白蛋白的荧光猝灭机制。结果表明，华法林对牛血清白蛋白的猝灭作用为动态猝灭过程，猝灭常数为6．05×104 L·mol<'-1>(16℃)和6.14×10<'4> L·mmol<'-1>(37℃)。并根据Foster的偶极-偶极无辐射能量转移理论，求得牛血清白蛋白一华法林的能量转移效率E为0.37，两者间的最近距离r为3.15am。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章综述

第二章水-乙醇混合溶剂中抗凝药物华法林的荧光光谱法测定研究

2.1前言

2.2实验部分

2.2.1仪器与试剂

2.2.2实验方法

2.3结果与讨论

2.3.1乙醇、水-乙醇混合溶剂中华法林钠的荧光光谱

2.3.2水和乙醇配比的选择

2.3.3酸度的影响

2.3.4温度的影响

2.3.5标准曲线、线性范围及检测限

2.4样品的测定及回收实验

2.4.1样品预处理及测定

2.4.2回收率的测定

2.4.3干扰实验

结论

参考文献

第三章β-环糊精增强荧光光谱法测定水介质中抗凝药物华法林含量

3.1前言

3.2实验部分

3.2.1仪器与试剂

3.2.2实验方法

3.3结果与讨论

3.3.1华法林钠的荧光光谱特性

3.3.2荧光增强剂的选择

3.3.3 β-环糊精用量的选择

3.3.4酸度的影响

3.3.5温度的影响

3.3.6标准曲线、线性范围及检测限

3.4样品的测定及回收实验

3.4.1样品的测定

3.4.2回收率的测定

3.4.3干扰实验

结论

参考文献

第四章抗凝药物华法林与β-环糊精的包合作用研究

4.1前言

4.2实验部分

4.2.1仪器与试剂

4.2.2实验方法

4.3结果与讨论

4.3.1华法林-β-环糊精包合物的荧光光谱

4.3.2华法林-β-环糊精包合物包合比的测定

4.3.3华法林-β-环糊精包合物包合平衡常数的测定

结论

参考文献

第五章高效毛细管电泳对华法林的测定方法研究

5.1前言

5.2实验部分

5.2.1仪器与试剂

5.2.2操作过程及电泳条件

5.3结果与讨论

5.3.1检测波长的选择

5.3.2缓冲溶液pH的影响

5.3.3缓冲溶液浓度的影响

5.3.4工作电压的影响

5.3.5华法林的电泳图及标准曲线、线性范围和检测限

结论

参考文献

第六章抗凝药物华法林与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

6.1前言

6.2实验部分

6.2.1仪器与试剂

6.2.2实验方法

6.3结果与讨论

6.3.1华法林、牛血清白蛋白及其混合溶液的荧光光谱

6.3.2华法林对牛血清白蛋白的荧光猝灭机理

6.3.3华法林对牛血清白蛋白猝灭常数的测定

6.3.4荧光给体-受体间距离和能量转移效率的测定

结论

参考文献

硕士期间发表(含待发表)论文

致谢