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拟南芥bHLH转录因子QQ1和QQ2功能的研究
摘要
关键词
Functional Study of bHLH Transcription Factors QQ
ABSTRACT
Key words
第一章 引言
1.1 植物转录因子的概述
1.1.1 植物转录因子的结构与分类
1.2 拟南芥bHLH转录因子的研究进展
1.2.1 bHLH转录因子的结构
1.2.2 bHLH转录因子的分类
1.2.3 拟南芥bHLH转录因子的生理功能
1.3 基因编辑技术
1.4 CRISPR-Cas9技术
1.4.1 CRISPR-Cas9系统的分类和构成
1.4.2 CRISPR-Cas9系统的作用方式
1.5 本研究的目的意义和主要研究内容
1.5.1 研究意义
1.5.2主要研究内容
1.5.3研究技术路线
第二章 QQ1和QQ2的生物信息学分析
2.1 实验方法
2.2 实验内容
2.2.1 生物信息学分析
2.2.2 QQ1和QQ2与At bHLH转录因子的多重序列比对与系统进化树分析
2.3 结果与分析
2.3.1 QQ1和QQ2基因的结构
2.3.2 QQ1与QQ2的氨基酸序列比对
2.3.3 QQ1和QQ2蛋白的理化性质
2.3.4 QQ1和QQ2蛋白的亚细胞定位预测
2.3.5 QQ1和QQ2蛋白的三级结构预测
2.3.6 QQ1和QQ2在不同的组织的表达模式
2.3.7 QQ1和QQ2与At bHLH转录因子的多重序列比对与系统进化树分析
本章小结
第三章 QQ1和QQ2过表达和突变体转基因植株的获得与分析
3.1 实验材料
3.1.1 植物材料及种植方法
3.1.2 菌株和质粒
3.1.3 抗体、酶及主要的生化试剂
3.2 实验方法
3.2.1 基因组总DNA的提取
3.2.2 植物总RNA的提取
3.2.3 PCR和RT-PCR
3.2.4 载体的构建
3.2.5 拟南芥的遗传转化
3.2.6 Western杂交技术
3.3 实验内容
3.3.1 QQ1和QQ2过表达株系的获得及筛选分析
3.3.2 qq1和qq2突变体系的获得及分析
3.4 结果与分析
3.4.1 QQ1和QQ2过表达株系的获得及分析
3.4.2 qq1和qq2突变体株系的获得及分析
本章小结
第四章 QQ1和QQ2的表达特性和功能的研究
4.1 实验材料
4.1.1 植物材料
4.2 实验方法
4.2.1 含有GUS的转基因植物的组织化学染色
4.2.2 烟草的瞬时转化
4.2.3 酵母双杂交实验
4.3 实验内容
4.3.1 QQ1和QQ2的表达特异性研究
4.3.2 QQ1和QQ2蛋白的亚细胞定位
4.3.3 QQ1和QQ2与PRE1在酵母体内相互作用的研究
4.3.4 QQ1和QQ2过表达植株的RNA-seq分析
4.4 结果与分析
4.4.1 QQ1和QQ2的表达特性研究
4.4.2 QQ1和QQ2的亚细胞定位
4.4.3 QQ1和QQ2与PRE1在酵母体内相互作用的研究
4.4.4 QQ1和QQ2过表达植株的RNA-seq数据分析
本章小结
第五章 结论
5.1 结论
5.2 下一步研究计划
附录1 论文中用到的引物
附录2 QQ1、QQ2与AtbHLH TF的多重序列比
附录3 各种培养基和溶液配置
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢
