生/熟地黄提取工艺考察及血清药物化学初步研究

摘要

地黄最早出现在《神农本草经》中，在书中被列为一级品。它是中国著名的“四大怀药”之一。在临床使用及治疗疾病上，具有几千年的历史。在我国的多个省市都有栽培，道地药材主产于河南武陟、修武、温县等地。地黄是指新鲜或干燥的地黄植物根块茎或其加工制品，分为三类:鲜地黄、生地黄、熟地黄。其中，鲜地黄可清热生津、凉血止血、保健；生地黄则清血热、养阴生津；熟地黄则养阴养血、补精补髓，三种药物疗效具有明显差异。在《中华人民共和国药典》(2015版）第一部中，约五分之一的中药处方涉及地黄。 中药在我国历史悠久，大多药物的使用需要口服用药。中药自口腔进入身体，在消化系统分解后吸收进入血液循环系统。药物与靶点位置结合后，发挥作用起到疗效。然而，由于中药的主要来源是动植物，大多数中药的药性极为多样，这不仅可从其生物多样性方面表现出来，也能从其成分复杂方面体现出来，中药的化学成分构成都极为复杂。同时，药物进入身体之后，要经过吸收、代谢最后排泄，在这个过程中，不同的环节药物成分会受到不同程度的影响，且这些影响也会对接下来的药物代谢造成干扰，使得药物在人体内的代谢过程变得极为复杂。古语有云，是药三分毒。这也就是说，药物有一定的毒副作用。由于毒副作用，大多药物在体内的含量在经过人体代谢之后都会变得极低。由于药物的含量较低，加大了研究的难度，限制了中药的研究发展，阻碍中药走向国际社会的步伐。随着检测手段的升级，药物分析检测技术也逐步提高。液相色谱-串联质谱(LC-MS）有着极高的灵敏度，且检测分析药物的精确度更高，具有较高的化合物的选择性。使得对于生物样品成分的检测分析成为可能。所以，本文以生地黄和熟地黄为研究对象，首先对其提取工艺进行考察。其次，利用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS）对药物的化学成分以及对其在人体内的代谢进程给予进一步探讨，为生地黄、熟地黄的进一步研究提供了药效物质基础相关数据。 生地黄和熟地黄提取工艺的考察。本研究以毛蕊花糖苷提取率为指标来优化生地黄和熟地黄的提取工艺，主要采用超声波辅助乙醇回流法提取，结合高效液相色谱法测定毛蕊花糖苷含量，通过单因素实验考察了乙醇浓度、液料比、提取时间、提取温度、超声功率等因素对生熟地黄中毛蕊花糖苷提取率的影响，在此基础上，采用响应面分析法优化提取工艺，并根据本实验结果来比较地黄炮制前后毛蕊花糖苷含量的变化，以期对地黄炮制过程工艺参数的控制及保证入药功效提供参考。 生地黄和熟地黄的化学成分分析。本研究以超高液相色谱-质谱联用技术为分析手段，通过一级质谱数据、多级质谱碎片数据、参考文献和标准品质谱数据确定结构式。结果从生地黄醇提液中共鉴定出20个化合物，包括10个环烯醚萜苷类化合物，苯乙醇苷类5个，核苷类3个有机酸类2个；熟地黄醇提液中共鉴定出17个化合物，其中环烯醚萜苷类7个，苯乙醇苷类5个，核苷类3个，有机酸类2个。 生地黄和熟地黄的血清药物成分研究。本研究以大鼠为实验对象，生地黄醇提液和熟地黄醇提液为药物，口服灌胃给药后，收集大鼠的血浆样品，采用ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱(2.1mm×50mm，1.7μm)，以乙腈－0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱，于电喷雾离子源（ESI）负离子模式下进行检测。结果从大鼠血浆中鉴定出8个原型化合物。 结论；本文阐述了生地黄、熟地黄的最佳提取工艺，探索了生地黄和熟地黄的醇提取液的化学成分，刻画了生地黄提取液液和熟地黄提取液液经口服后在体内的成分变化。为生地黄和熟地黄在提取工艺的研究上提供了具有借鉴意义的数据。同时为生地黄和熟地黄在临床的安全评价、药理药效作用研究、质量控制等方面提供了良好的化学物质基础。

目录

1绪论

1.1 地黄简介

1.2 中药血清药物化学研究现况

1.3 液质联用技术在中药血清药物化学中的应用和发展

1.4 本研究的目的和意义

2基于 HPLC生、熟地黄的提取工艺研究

2.1 引言

2.2 分析方法的建立

2.3 响应面法生熟地黄提取工艺的研究

2.4 结果与分析

3基于液质联用技术的生熟地黄体外化学成分差异分析

3.1 引言

3.2 实验材料

3.3 实验方法

3.4 实验结果

3.5 本章小结

4生地黄和熟地黄血清药物化学初步研究

4.1 引言

4.2 血液中移行成分的检测

4.3 血中移行成分鉴定方法

4.4 血清成分分析结果

4.5 本章小结

5结论总结与展望

5.1 主要研究成果

5.2 展望

致谢

参考文献

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