丁香酚对多重耐药大肠杆菌的抑菌活性及其机制研究

摘要

近年来，由于抗生素的滥用，细菌的多重耐药问题日益凸显，导致临床上能有效治疗细菌性疾病的抗生素越来越少，因此寻求新的有效抑菌药物尤为紧迫。中药具有不易产生耐药性、毒副作用小和药效明显等优点，已成为筛选高效低毒的植物源抑菌剂重要的来源之一。本研究以临床分离的多重耐药大肠杆菌为研究对象，从10种中药中筛选出对多重耐药菌株有明显抑菌活性的中药，并对其主要抑菌成分进行提取分离，最后对该抑菌成分的抑菌活性及作用机制进行研究，研究结果为临床新药开发提供了理论基础。主要结论如下： 依据药敏实验和耐药特性的结果，从81株临床来源的大肠杆菌中筛选出1株生物被膜形成能力强、耐药谱广的多重耐药菌株，编为Ec04，将其作为后续分析的研究对象。 以Ec04多重耐药大肠杆菌为受试菌，分析了大黄等10种中药的抑菌活性。结果表明丁香醇提液对Ec04多重耐药大肠杆菌有明显的抑菌活性。采用有机溶剂萃取法和柱层析法对丁香醇提液中的主要活性成分丁香酚进行分离纯化，得到丁香酚单体的溶液。通过三氯化铁反应（FeCl3）、薄层色谱（TLC）和核磁共振氢谱（1H-NMR）鉴定分析，表明该单体物质为丁香酚。经高效液相色谱（HPLC）检测分析可知，丁香酚的含量为8.23mg/mL，纯度为97.43%。 采用微量二倍稀释法和琼脂扩散法，分析了制备丁香酚对Ec04多重耐药大肠杆菌的抑菌活性，其最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）分别为2.5mg/mL和5mg/mL。最后研究了丁香酚对Ec04多重耐药大肠杆菌的抑菌机制，结果表明，丁香酚可延长Ec04菌从迟缓期进入对数生长期的进程，增加了菌株可溶性蛋白的含量和胞外核酸的量，提高了菌体培养液中的电导率，并破坏了其生物被膜的形成。

目录

1前言

1.1大肠杆菌耐药性的概述

1.2植物源抑菌剂的研究和进展

1.3本课题的研究基础

1.4立题目的和意义

1.5研究内容

2多重耐药大肠杆菌的特性分析

2.1实验材料

2.2实验方法

2.3结果与分析

2.4多重耐药大肠杆菌特性分析的结果

2.5小结

3植物源抑菌剂的提取、筛选及纯化鉴定

3.1实验材料

3.2实验方法

3.3结果与分析

3.4讨论与小结

4丁香酚对 Ec04多重耐药大肠杆菌的抑菌活性及作用机制

4.1实验材料

4.2实验方法

4.3结果与分析

4.4讨论与小结

5总结与展望

5.1总结

5.2创新点

5.3展望

致谢

参考文献

攻读学位期间发表的科研成果目录

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