人骨形态发生蛋白2基因转染成纤维细胞后的稳定表达和诱导成骨的实验研究

摘要

该研究构建人BMP<,2>基因真核表达载体,并将其转染成纤维细胞,探讨人BMP<,2>基 因能否在成纤维细胞内稳定表达、外源目的基因BMP<,2>的导入对成纤维细胞生物学性状的 影响及表达BMP<,2>的成纤维细胞是否具有体内诱导成骨能力.为将来将人BMP<,2>基因导入自体成纤维细胞,进而将稳定表达人BMP<,2>基在的自体成纤维细胞植入体内进行骨损伤修 复的基因治疗奠定基础.结论:(1)成功构建重组真核表达载体pcDNA<,3>-hBMP<,2>.(2)在脂质体介导下,重组真核表达载体pcDNA<,3>-hBMP<,2>可以导入成纤维细胞NIH3T3.(3)转 染pcDNA<,3>-hBMP<,2>后的成纤维细胞能够稳定表达hBMP<,2>.(4)转染pcDNA<,3>-hBMP<,2>对纤维细胞增殖及细胞周期无影响.(5)转染pcDNA<,3>-hBMP<,2>后的成纤维细胞具有向成骨细胞系分化的特性.(6)稳定表达hBMP<,2>的成纤维细胞具有体内诱导成骨能力.

目录

缩写词表

前言

第一部分文献回顾

1.基因治疗在骨科疾病中的应用

2.骨形态发生蛋白的研究现状

3.BMP与骨损伤的基因治疗

第二部分真核细胞表达载体pcDNA3-hBMP2的构建

1.实验材料

2.实验方法

3.结果

4.讨论

第三部分pcDNA3-hBMP2转染成纤维细胞及其稳定表达

1.实验材料

2.实验方法

3.结果

4.讨论

第四部分pcDNA3-hBMP2转染对成纤维细胞生物学性状的影响

1.实验材料

2.实验方法

3.结果

4.讨论

第五部分稳定表达hBMP2的成纤维细胞体内诱导成骨的研究

1.实验材料

2.实验方法

3.结果

4.讨论

附图

小结

致谢

参考文献

附录在读期间发表论文