突变受体阻断NIH3T3细胞中rhBMP-2诱导的信号转导的研究

摘要

骨形成蛋白(BMP)是一个至少包括20个成员的家族,其成员在结构上相似,但其功能在不同时期、不同阶段有着极大的差异.为研究BMP信号转导在组织发育和细胞分化中的作用,研究人员以BMPⅡ型突变受体的cDNA为目的基因,以小鼠成纤维细胞为载体细胞,构建了稳定表达BMPⅡ型突变受体的细胞株.从而为从信号转导水平探讨BMP对细胞分化及组织器官发育的调控作用奠定了基础.该实验中采用ALP活性及OC含量作为判断NIH3T3细胞介否具有成骨倾向的指标.结果显示:未转染细胞体积变小,由梭形向多角形转化;而转染细胞未见明显变化.未转染细胞增殖活性下降、DNA合成变慢,ALP活性和OC含量均增高,而未转染细胞在加入rhBMP-2前后以上指标未有显著性差异.这说明rhBMP-2的信号转导被BMPⅡ型突变受体阻断了.该研究进一步证实了BMP的信号转导途径及BMPⅡ受体在该过程中的重要作用.该实验室的前期研究表明,BMP有可能通过某种机制促进骨肿瘤细胞的增殖活性而引起肿瘤的预后不良,而应用BMP单抗及转染反义BMP基因可以抑制肿瘤细胞的增殖.该实验表明:BMPⅡ型突变受体可以比BMP单抗及反义BMP基因更有效的阻断BMP的信号,因此在探讨骨肿瘤细胞的基因治疗方面具有广阔的应用前景.

目录

缩略语表

前 言

文献综述

综述一

综述二

实验研究

研究一BMP Ⅱ型突变受体真核表达载体的构建与鉴定

参考文献

附图

研究二稳定表达骨形成蛋白Ⅱ型突变受体的NIH3T3细胞的 建立及鉴定

参考文献

附图

研究三BMP-2的信号转导在NIH3T3细胞中的表达

参考文献

附图

研究四rhBMP-2诱导NIH3T3细胞向成骨细胞表型转化

参考文献

附图

研究五突变受体阻断NIH3T3细胞中rhBMP-2诱导的 信号转导

参考文献

附图

致谢

个人简历